elisa檢測試劑盒常見問題以及解決方法！

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1、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?
建議血清應保存在-2O℃。若一次無法用完一瓶，無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。將血清從冷凍箱取出后，置于2～8℃冰箱使之緩慢融解，一般是融解過夜。
2、血清中包含絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?
沉淀主要成分是纖維蛋白和脂蛋白，不會影響血清品質。 首先讓其沉淀在瓶子底部，中上層無沉淀血清直接轉出使用，下層血清裝到50ml無菌離心管，400g，離心3分鐘即可除去 (一般不建議采用過濾的方法除去沉 淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。
3、實驗室如何選擇適合的血清?
稀有的澳洲血清培養嬌貴細胞(小鼠ES、原代細胞分離培養)，南美血清或國產胎牛血清用于癌細胞、常規細胞系培養(用量大)，新生牛血清用于病毒包裝(構建穩轉細胞株)。
4、微生物培養基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時，您應該在兩周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
5、有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示，經過正確處理的熱滅活血清，對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。 若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節省時間，更確保血清的質量!
6、細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成，首先，要肉眼觀察微生物培養基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養細胞生長的狀態，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，微生物培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。 如果在鏡下觀察細胞，生長狀態良好，與黑點出現前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現可能與以下幾種情況有關

(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;

(2)血清質量不好，反復凍融的結果;

(3)配制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(4)培養原代細胞中出現小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。

 7、EDTA在細胞消化過程中起什么作用?

EDTA是一種螯合劑，它可以螯合Ca2+ 或Mg2+，而細胞表面很多和培養皿或培養瓶結合的蛋白都是帶有Ca2+ 或Mg2+的，把這些離子螯合后，可以加速細胞和培養皿的脫離，促進消化。上皮類細胞的連接存在“橋粒”結構，是細胞間“牢固”的連接，但橋粒的形成依賴于鈣離子的存在。在胰酶消化細胞時，加入EDTA，可以破壞細胞的橋粒結構，使細胞能夠分散成單個細胞。通俗地說，就是破壞細胞間的粘連。

8、如何選用特殊細胞系培養基?

培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。選DMEM做貼壁細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養。

9、 怎樣讓細胞適應新的條件?

從原條件逐漸過度：1/4、1/2、3/4，后是*新培養基。

10、為何微生物培養基保存于4℃，顏色會偏暗紅色?

（1）.培養基內之CO2會逐漸溢出，造成微生物培養基越來越偏堿性。顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。

（2）.培養基偏堿之結果，將造成細胞生長停滯或死亡。需調整pH值至7.0~7.2. 11、細胞凍存管應如何解凍? 37℃，1~2分鐘內全部融解。 冷凍管建議放在液氮液面上面，由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全(戴護目鏡)，預防冷凍管之爆裂。