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    島津云學院-課后答疑系列 液相色譜篇

    儀表科普 2020年03月11日 10:38:25來源:島津 30483
    摘要島津云學院”系列開播以來,得到了眾多用戶的觀看和支持。在直播互動交流中,收到了很多提問,島津十分重視各位用戶提出的問題。

      【儀表網 儀表科普】“島津云學院”系列開播以來,得到了眾多用戶的觀看和支持。在直播互動交流中,收到了很多提問,島津十分重視各位用戶提出的問題,今天將開啟島津云學院答疑系列,為大家作詳細解答!
     
      ★請問老師一般液相廢液怎么處理?
     
      答:需要明確的是,液相色譜的廢液中含有大量的有機溶劑以及所測試的樣品,大部分情況下是有毒有害的,因此不能直接傾倒至環境中,或者流入實驗室下水道中,需要集中處理。一般而言,可以根據不同的情況進行處理:
     
      1、如果廢液量較少:如分析型色譜的廢液,可先行收集,然后等待集中處理(尤其是含有劇毒成分的),比如尋找專業的廢液回收機構;如果所在單位/機構不支持集中處理,則可以找安全的地方焚燒或填埋(含酸的需用廢堿中和,含鹽的可以直接倒掉)。
     
      2、廢液量很大:如制備色譜的廢液,則考慮通過精餾系統,將廢液分餾后再次使用。
     
      3、也可以通過“循環閥”,將未污染的流動相再次回收利用。如島津針對分析型液相和制備型液相都可以提供相應的“溶劑循環閥”,將分析過程中未受到污染的流動相,如色譜峰之間平直的基線(于等度條件下)回收至溶劑瓶中,將能夠大大提升溶劑使用效率,降低實驗室成本。
     
      ★新買色譜柱如何進行測試?
     
      答:對于液相色譜柱來講,拿到一根新的色譜柱,先測柱效、拖尾因子、柱壓(減去系統壓力),并記錄結果。
     
      之后使用過程中應定期測試,追蹤色譜柱性能。因不同類型色譜柱差別較大,因此對于所使用的方法,請根據說明書上的液相條件和測試樣品進行,同時需要確保儀器的狀態正常。
     
      ★色譜柱用什么沖洗?
     
      答:反相與正相體系清洗方式有所不同:
     
      反相色譜柱
     
      1、日常清洗:10%甲醇水(去除極性大的雜質)→純甲醇(去除非極性雜質)。
     
      2、流動相中含有離子對試劑:50%有機溶劑(10倍柱體積)??%有機溶劑(20倍柱體積)?%有機溶劑(20倍柱體積)→保存。
     
      3、生物樣品(蛋白質/多肽)污染的色譜柱:B 5% →B 100%的梯度洗脫×3次(A:0.1%TFA  B:0.1%TFA in CH3CN)?%有機溶劑(20倍柱體積)→保存。
     
      正相色譜柱
     
      親水性雜質吸附太強,常規清洗效果不明顯,可以逐級增加洗脫強度,每級至少確保10倍柱體積。
     
      I級:100%正己烷
     
      II級:100%乙酸乙酯
     
      III級:50%三氯甲烷-50%甲醇
     
      注意:回歸到初流動相條件時,請務必先用異丙醇過渡。
     
      ★用反相色譜的液相系統可以跑正相嗎?剛剛老師提到用異丙醇沖洗管路,那我跑完反相的用異丙醇沖洗是不是就可以跑正相了?
     
      答:一般來講,當把一臺液相色譜儀即當作正相色譜用,也當做反相色譜用的時候,在兩個不同分析模式之間切換時需要用異丙醇做充分的過渡(比如通宵低流速異丙醇沖洗管路),其主要是利用異丙醇可以分別與正/反相溶劑互溶的特性,避免流動相殘留造成的影響。
     
      但有一點需要注意的是,所使用的液相色譜儀是否適用于正相溶劑。通常液相色譜儀的主要設計目的是適用于反相體系使用,因此在使用正相體系前,好與供應商確認,尤其是使用特殊溶劑前(如HFIP,DMF等)。
     

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