【儀表網(wǎng) 行業(yè)標準】上海市凈水技術學會發(fā)布了團體標準《水中微生物含量的測定 三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光法》征求意見稿，現(xiàn)予征求意見。意見反饋郵箱：50706127@qq.com。
為貫徹《關于加強城市供水安全保障工作的通知》(建辦城〔2022〕41 號)，提高供水突發(fā)污染應對能力，加強水廠精細化管理，保障供水生物安全，規(guī)范水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的測定，為《上海市城市總體規(guī)劃(2017-2035 年)報告》中“全市供水水質達到國際先進標準，滿足直飲需求”提供技術支撐，編制組經(jīng)廣泛調查研究，并在充分征求意見的基礎上，制定本標準。
本標準參照 GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第 1 部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
本標準起草單位：上海浦東水務(集團)有限公司、東方國際集團上海環(huán)境科技有限公司、上海南匯自來水有限公司、哈希水質分析儀器(上海)有限公司、同濟大學、天津泰達水業(yè)有限公司、上海青浦自來水有限公司、上海市松江自來水有限公司、上海市自來水奉賢有限公司、沈陽水務水質檢測技術發(fā)展有限公司、衡陽市清源水質檢測有限公司、廈門理工學院、廈門市水資源利用與保護重點實驗室、昆山市自來水集團有限公司。
本標準中的“微生物”是指具有細胞結構的微生物，如細菌、真菌、藻類和原生動物等。本標準規(guī)定了測定水中微生物三磷酸腺苷(ATP)的生物發(fā)光法。
本標準適用于以水為基質的樣品，包括地表水、水源水、工藝過程水、生活飲用水、直飲水和瓶裝水等。
當制備試樣的樣品體積為50mL 時，方法檢出限為0.17pg/mL，測定下限為0.68pg/mL。本標準不適用于溶解性總固體>10000mg/L 的水樣，也不適用于含高濃度有機物、重金屬等干擾物質的水樣。
方法原理：
ATP 是高等植物細胞、高等動物細胞和微生物細胞的主要組成部分，通過測定活性細胞內(nèi)的 ATP 濃度，可以快速反映水中活性微生物的含量。測定過程中，ATP 和熒光素、熒光素酶等快速反應產(chǎn)生光，經(jīng)由 ATP 標準物質校準的光度計測定 RLU，根據(jù)公式計算最終得到 ATP 濃度。
儀器和設備：
不應將一次性耗材經(jīng)高壓滅菌后重復使用，不應使用含有熒光物質的記號筆。
1.光度計：使用光電倍增管，波長范圍至少覆蓋530±20nm，測量結果為 RLU。
2.微量移液器：固定式100μL 和1000μL，可調式100～1000μL。
3.高壓蒸汽滅菌器：121 ℃可調，用于實驗用水等的滅菌。
4.干熱滅菌器：160 ℃～180 ℃可調，用于玻璃采樣容器和無菌瓶等的滅菌。
5.采樣容器：帶螺旋蓋的無菌瓶或無菌袋，容積>100mL，玻璃、PP和 HDPE 等材質。
6.注射器：容積刻度≥50mL，具活塞，無針頭，魯爾接口，PP 材質，無菌獨立包裝，一次性使用。
7.測光管：尺寸和光度計(6.1)適配，PP 材質，無菌包裝，一次性使用。
8.測光管架：尺寸和測光管(6.7)適配。
9.微量移液器吸頭：200 μL 和 1000 μL，與微量移液器(6.2)適配，PP 材質，必須為無菌原盒包裝，一次性使用。
10.針頭過濾器：濾盤直徑≤35 mm，孔徑 0.45 μm，魯爾接口與注射器(6.6)適配，水系混合纖維素酯(MCE)、玻璃纖維等材質，無菌包裝，一次性使用。
11.實驗室常用儀器、設備和器材。
實驗環(huán)境：
操作人員應佩戴個人防護用品(7.1～7.3)，對實驗桌面和儀器進行表面消毒(7.4)，減少環(huán)境對實驗全過程的污染。無菌室不是必須的。
質量保證和質量控制：
1.空白實驗
每批(或20個)樣品應對1個空白試樣(9.4)進行全程序空白實驗，測定結果應<方法檢出限。
2.單點校準
完成當日所有試樣測定后，宜進行一次單點校準，評估當日測定數(shù)據(jù)的有效性。
詳情請見附件。
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