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培養(yǎng)基配制的一般方法步驟2025/07/29: 培養(yǎng)基配制的一般方法步驟：1、稱量：按照培養(yǎng)基配方，正確稱取各種原料放于搪瓷杯中。2、溶化：在搪瓷杯中加入所需水量（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入蒸餾水或自來(lái)水），用玻棒攪勻，加熱溶解。3、調(diào)pH值（調(diào)pH也可以在加瓊脂后再調(diào)），用1NNaOH或1NHCl調(diào)pH，用pH試紙對(duì)照。4、加瓊脂溶化，在瓊脂溶化過(guò)程中，需不斷攪拌，并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦，待全溶化后，補(bǔ)足所失水分，一般數(shù)量少，時(shí)間短不必補(bǔ)水。5、分裝：在漏斗架上分裝。根據(jù)不同的需要進(jìn)行分裝，一般制斜面的裝置為管高的1／5特別注意不要使培養(yǎng)基

如何讓細(xì)胞快樂(lè)方法？2025/07/17: 細(xì)胞是生物體的結(jié)構(gòu)和功能的基本單位生物學(xué)名詞。一般具有細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。植物細(xì)胞的細(xì)胞膜外還有細(xì)胞壁。體形極微，在顯微鏡下始能窺見。形狀多種多樣，主要由細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成，表面有薄膜。動(dòng)植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)大致相同。植物細(xì)胞質(zhì)膜外有細(xì)胞壁，細(xì)胞壁中常有質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細(xì)胞中則無(wú)。細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)和繁殖等機(jī)能。細(xì)胞是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞心情不好，那么實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也不會(huì)好到哪兒去。如何讓細(xì)胞快樂(lè)？下面就仔細(xì)了解一下吧!1.確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無(wú)菌交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵

PCR基因擴(kuò)增技術(shù)特點(diǎn)匯集2025/07/08: 基因擴(kuò)增技術(shù)(PCR)聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction簡(jiǎn)稱PCR)又稱無(wú)細(xì)胞分子克隆系統(tǒng)或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增法，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。PCR的特點(diǎn)：一、特異性高報(bào)導(dǎo)的PCR所用的DNA聚合酶是大腸桿菌的DNAPolymeraseI的Klenow大片段，其酶活性在90℃會(huì)變性失活，需每次PCR循環(huán)都要重新加入Klenow大片段，同時(shí)引物是在37℃延伸(聚合)易產(chǎn)生模板—引物之間的堿基錯(cuò)配、致特異性較差，1988年Saiki等從溫泉水中分離到的水

ELISA實(shí)驗(yàn)洗板過(guò)程具體要求2025/07/01: 在ELISA實(shí)驗(yàn)中，浸泡式洗板步驟是至關(guān)重要的，用于去除未結(jié)合的抗體、抗原和酶標(biāo)記物，從而減少背景信號(hào)，提高檢測(cè)的特異性和靈敏度。在洗板過(guò)程中，拍干動(dòng)作需要謹(jǐn)慎操作以避免孔間交叉污染和不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體要求包括：1.垂直拍干：確保拍板時(shí)垂直進(jìn)行，避免水平或斜向移動(dòng)，這樣可以減少液體在孔壁上的橫向流動(dòng)，從而降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。2.輕柔操作：用力不能過(guò)猛，以免損壞酶標(biāo)板或使抗原抗體復(fù)合物脫離結(jié)合位點(diǎn)。3.一次性吸水紙：使用一次性、不易脫落碎屑的吸水紙，防止細(xì)小的顆粒物污染板孔。4.迅速拍干：動(dòng)作

不同類型的ELISA試劑盒的靈敏度要求2025/06/24: ELISA試劑盒的靈敏度是衡量其檢測(cè)低濃度目標(biāo)分子能力的重要參數(shù)。一個(gè)高質(zhì)量的ELISA試劑盒通常具備高靈敏度，這意味著它能夠檢測(cè)到極低濃度的靶標(biāo)分子。例如，艾美捷人補(bǔ)體C5（C5）ELISA試劑盒的靈敏度低于1.39ng/ml，這意味著它可以檢測(cè)到非常低濃度的補(bǔ)體C5。此外，不同類型的ELISA試劑盒可能有不同的靈敏度要求：夾心法ELISA：這種類型通常用于大分子蛋白的檢測(cè)，如細(xì)胞因子和抗體，具有較高的靈敏度。例如，某些夾心法ELISA試劑盒可以檢測(cè)到低至pg/mL級(jí)別的目標(biāo)蛋白。競(jìng)爭(zhēng)法ELI

ELISA試劑盒是否造假辨別方法2025/06/16: 如果購(gòu)買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否造假，方法如下：1、取出購(gòu)買的試劑盒A的包被板兩條。2、一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。3、另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。5、實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。6、如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同

PCR電泳技術(shù)流程步驟2025/06/09: PCR電泳是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，結(jié)合了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定和驗(yàn)證目標(biāo)DNA片段的存在。這一技術(shù)的流程包括以下幾個(gè)步驟：1.DNA提取：從樣品中提取基因組DNA，通常使用特定的試劑盒，如TIANampGenomicDNAKit，確保DNA的純度和完整性。2.PCR擴(kuò)增：根據(jù)目標(biāo)序列設(shè)計(jì)特異性引物，通過(guò)三步法程序（預(yù)變性、變性、退火）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增特定的DNA區(qū)域。擴(kuò)增條件包括98℃預(yù)變性10秒，55℃變性5秒，72℃退火5秒，循環(huán)40次。3.電泳分析：將PCR

抗原兩種特性具體分析2025/06/04: 凡能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能與其相應(yīng)抗體或致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)，統(tǒng)稱為抗原。根據(jù)抗原的概念可以看出抗原有兩種特性，具體分析如下：1、免疫原性（immunogenicity）即抗原刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的過(guò)程。該過(guò)程包括：抗原進(jìn)入機(jī)體后，刺激淋巴細(xì)胞活化、增殖、分化，產(chǎn)生抗體或致敏的效應(yīng)淋巴細(xì)胞。2、反應(yīng)原性（reactogenicity）即抗原與相應(yīng)抗體或致敏的效應(yīng)T細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的性能，又稱免疫反應(yīng)性（immunoreactivity）。同

細(xì)胞培養(yǎng)中血清重要的功能2025/05/27: 血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，具有極為重要的功能：1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2、提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5、起酸堿度緩沖液作用。6、提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余yi蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用標(biāo)準(zhǔn)2025/05/14: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的使用遵循一系列規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)，旨在確保測(cè)量的準(zhǔn)確性、可靠性和可追溯性。主要標(biāo)準(zhǔn)包括：1.選擇與適用：根據(jù)測(cè)量目的和要求，從國(guó)家質(zhì)檢總局發(fā)布的“標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品目錄”中選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。優(yōu)先選用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（CRM），其特性值經(jīng)過(guò)計(jì)量學(xué)上有效程序測(cè)定并附有證書。2.證書閱讀與驗(yàn)證：仔細(xì)閱讀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書，確保理解其用途、特性值、不確定度、基體組成、有效期、保存條件、安全防護(hù)及特殊運(yùn)輸要求。必要時(shí)，進(jìn)行額外確認(rèn)，如檢查包裝、標(biāo)簽、證書的完整性和有效期。3.穩(wěn)定性與有效期：確保標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在有效期

熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中各個(gè)環(huán)節(jié)的對(duì)照2025/05/06: 對(duì)照的目的是對(duì)檢測(cè)的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控，因此我們按照檢測(cè)的流程對(duì)對(duì)照進(jìn)行梳理。常規(guī)熒光定量PCR的流程是：樣品采集-運(yùn)輸-樣品處理-核酸提取-反轉(zhuǎn)錄（RNA病毒）-擴(kuò)增-結(jié)果讀取。下面看看各個(gè)環(huán)節(jié)都可以使用哪些對(duì)照？1、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照是指在相同的處理?xiàng)l件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進(jìn)行了提取和擴(kuò)增最終獲得了陽(yáng)性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽(yáng)性對(duì)照強(qiáng)調(diào)處理過(guò)程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。2.擴(kuò)增對(duì)照我們通常說(shuō)的陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照指的是擴(kuò)增試劑盒中附帶的不需要

血清中的沉淀是什么？2025/04/27: 血清中的沉淀是什么？用于細(xì)胞培養(yǎng)的各種血清產(chǎn)品中都存在各種類型的沉淀。除了膽gu醇和一些蛋白沉淀之外，血清中也會(huì)含有纖維蛋白和磷酸鈣。雖然沉淀可引起初始問(wèn)題，但在細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用方面，沉淀一般不會(huì)對(duì)血清的性能產(chǎn)生影響。1.纖維蛋白肉眼可見的較大物質(zhì)，可達(dá)1-2mm。血清是在低溫條件下收集并迅速加工處理，導(dǎo)致一些纖維蛋白原仍存在于溶液中。雖然過(guò)濾去除了絕大部分的纖維蛋白，但解凍過(guò)程中，纖維蛋白原會(huì)再次轉(zhuǎn)化成纖維蛋白析出，形成沉淀。2.磷酸鈣一種常見的沉淀物，表現(xiàn)為云狀。通過(guò)倒置顯微鏡觀察，會(huì)發(fā)現(xiàn)許多小

大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞分離與培養(yǎng)2025/04/21: 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞分離與培養(yǎng)：1、無(wú)菌條件下，取出1-3d齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；2、往組織塊中加入4mL酶消化液（0.1%和0.1%I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10%FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織全被消化；4、用20

ELISA檢測(cè)試劑盒代測(cè)服務(wù)項(xiàng)目2025/04/15: ELISA檢測(cè)試劑盒代測(cè)服務(wù)項(xiàng)目：一、適合客戶1、沒(méi)有時(shí)間和精力完成生化測(cè)定的客戶。2、缺乏生化測(cè)定經(jīng)驗(yàn)和技巧的客戶。二、代測(cè)指標(biāo)除了極少數(shù)凍存狀態(tài)下不穩(wěn)定的指標(biāo)外，例如輔酶Ⅰ含量和輔酶Ⅱ含量，網(wǎng)站上最新列出的所有指標(biāo)都可以代測(cè)，具體請(qǐng)咨詢銷售。三、代測(cè)的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)1、優(yōu)點(diǎn)：代測(cè)由負(fù)責(zé)研發(fā)該生化指標(biāo)試劑盒的專家親自測(cè)定，確保短期內(nèi)獲得可靠的數(shù)據(jù)，避免了客戶因?yàn)槿狈y(cè)定經(jīng)驗(yàn)和技巧造成的試劑和樣品浪費(fèi)。2、缺點(diǎn)：相比客戶購(gòu)買試劑盒后自行測(cè)定，代測(cè)需要另外支付人工費(fèi)，總體支出明顯增加，僅適合于經(jīng)費(fèi)相對(duì)

單克隆抗體的應(yīng)用方面盤點(diǎn)2025/04/07: 單克隆抗體：1.概念：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。2.特點(diǎn)：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)，靈敏度高。3.單克隆抗體的應(yīng)用：（1）診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。（2）藥物導(dǎo)向治療：運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)”（3）分離和純化抗原分子。單抗的制備過(guò)程：1.動(dòng)物免疫：注射特定抗原蛋白2.分離脾淋巴細(xì)胞：與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合，人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。3.細(xì)胞融合：淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備4.雜交瘤細(xì)胞的篩選：H

PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)步驟2025/03/31: 反應(yīng)步驟：1、變性：利用高溫（93-98℃）使雙鏈DNA解螺旋，高溫使兩條DNA鏈間的氫鍵斷裂。在第一個(gè)循環(huán)之前，通常加熱時(shí)間較長(zhǎng)以確保模板DNA全分離，僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘，接下來(lái)機(jī)器就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。2、退火：將反應(yīng)溫度降低至50-65℃（通常比引物值低3-5℃）持續(xù)20-40s，從而使引物結(jié)合于單鏈DNA上。若退火溫度過(guò)低，容易造成非特異擴(kuò)增，而退火溫度過(guò)高，引物可能根本不結(jié)合。3、延伸：此步驟的溫度取決于所用的DNA聚合酶。Taq（Thermusaquaticus

PCR反應(yīng)中的變性步驟核心要點(diǎn)2025/03/24: PCR反應(yīng)中的變性步驟是解離雙鏈DNA為單鏈的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，其作用機(jī)制及參數(shù)設(shè)置直接影響擴(kuò)增效率。以下是核心要點(diǎn)：1.變性目的雙鏈解離：通過(guò)高溫（通常93-98℃）破壞雙鏈DNA的氫鍵，形成單鏈模板，便于引物結(jié)合。預(yù)變性必要性：首ci循環(huán)前需3-5分鐘預(yù)變性（如基因組DNA），確保復(fù)雜模板全解鏈，尤其對(duì)長(zhǎng)片段或高GC含量的DNA更關(guān)鍵。預(yù)變性還能激活熱啟動(dòng)酶（需高溫解除抑制）或裂解細(xì)胞釋放基因組（如直接以菌體為模板）。2.溫度與時(shí)間參數(shù)常規(guī)設(shè)置：多數(shù)情況下，變性溫度為94-95℃，持續(xù)15-30秒。

ELISA實(shí)驗(yàn)洗板兩種方法簡(jiǎn)述2025/03/17: 在做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，洗板有兩種方法：手工法洗板和洗板機(jī)洗板。二者沒(méi)有本質(zhì)的差別,只要操作合乎要求,均能得到正確、可靠的結(jié)果。手工洗板是每次反應(yīng)溫育后,將反應(yīng)液吸出或甩干,然后在板孔中加滿洗液,放置2～3min后,將洗液吸出或甩干再在吸水紙上拍干。重復(fù)上述洗滌步驟3～4次,最后在吸水紙上拍干即可。手工洗板人為因素比較大,實(shí)驗(yàn)人員必須經(jīng)驗(yàn)豐富,洗滌次數(shù)要足夠,沖擊力又不要太大,加入的洗液量以剛滿反應(yīng)孔為限,防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈,同時(shí)防止孔與孔之間液體交叉。洗滌結(jié)束后扣干亦非常重要,否則易造成

ELISA檢測(cè)試劑盒包被原理2025/03/11: ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)可以說(shuō)是現(xiàn)在運(yùn)用最多的檢測(cè)辦法，并且技術(shù)手段許多，關(guān)于花板，假陽(yáng)性，全顯色，悉數(shù)顯色，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的效果，必定要多留心，那么ELISA檢測(cè)系統(tǒng)安穩(wěn)，這些實(shí)驗(yàn)進(jìn)程都要留心。包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其辨認(rèn)，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)厲正告我必定要在冰浴下緩慢消融就是這個(gè)道理。封suo就是讓很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇，然后排擠ELISA后的過(guò)程中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)由于實(shí)驗(yàn)的

二抗選擇時(shí)需要考慮的因素2025/03/03: ?二抗（secondaryantibody）?：直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合，通常用于標(biāo)記和檢測(cè)一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。選擇二抗時(shí)需要考慮的因素:1、?一抗的種屬來(lái)源?：二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源。例如，如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。2、?一抗的類別和亞類?：二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體；單克隆抗體由于存在不同的

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