src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)正在熱銷的產(chǎn)品：Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit 人痢疾內(nèi)阿巴抗原，99%
Human Lyme IgG ELISA Kit 人萊姆IgG >97.0%(T),>70%(GC)
Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit 人空腸彎曲菌
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
英文名稱：1-Naphthyl PP1
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10762
產(chǎn)品介紹:
1-Naphthyl PP1(1-NA-PP1)是src家族抑制劑，對v-Src，c-Fyn，c-Abl，CDK2和CAMK II的IC50分別為1.0，0.6，0.6，18和22_mu_M。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號：221243-82-9 別名：1-NA-PP 1 純度：98.56% 分子量：317.39 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
谷棒桿菌熒光標(biāo)記豬胰島蛋白Anti-HGFAC Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
頭狀禿馬勃熒光標(biāo)記雞卵白蛋白Anti-HGH1 Antibody人抗組蛋白抗體(AHA)
綠黃鏈霉菌熒光FITC標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)Anti-HGH1 Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
Aeromonas aquariorum熒光標(biāo)記牛IgGAnti-HIBADH Antibody人晶體蛋白α(Cryα)
林生毛霉熒光標(biāo)記牛IgMAnti-HIF3A Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
美澳型核果褐腐病菌熒光標(biāo)記雞IgGAnti-Hip Antibody人晶體蛋白β(Cryβ)
密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種熒光標(biāo)記雞IgMAnti-HIF3A Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
甜菜慢生根瘤菌熒光標(biāo)記狗IgGAnti-HIPK4 Antibody人抗膠原蛋白抗體(CLA)
熱葡糖土芽孢桿菌熒光標(biāo)記狗IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
欽海特德沃斯氏菌熒光FITC標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Anti-HIST1H2BB Antibody人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)
枯草芽孢桿菌熒光標(biāo)記羊IgMAnti-HIST1H2BH Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)
枯草芽胞桿菌枯草亞種熒光標(biāo)記豚鼠IgGAnti-HIRA Antibody人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種熒光標(biāo)記豚鼠IgMAnti-Histone H3 Antibody人抗核周因子抗體(APF)
多粘類芽胞桿菌熒光標(biāo)記馬IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核周因子抗體(APF)
長柄條孢牛肝熒光標(biāo)記馬IgMAnti-HK3 Antibody人抗核抗體(ANA)
乳桿菌屬熒光標(biāo)記人IgGAnti-HLA-DOA Antibody人抗核抗體(ANA)
紅細(xì)胞膜蛋白STOM抗體白腐菌人肝腹水腺癌細(xì)胞
鈉依賴性脯轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體小刺青霉大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞
基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體產(chǎn)紫青霉人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（白介21基因修飾）
鈉離子通道蛋白7α/Na+CPtypeVIIα抗體淡紫青霉人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)天藍(lán)色鏈霉 液體雙抗增液Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基端肽
曲霉 WLD培養(yǎng)基Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽
康寧木霉 不*瓊脂培養(yǎng)基抗性磷
LS培養(yǎng)基雌二
秦氏蜜環(huán) 直接藍(lán)6黃體生成
豬布魯氏 Culture培養(yǎng)基催乳
釀酒酵母 瓊脂LT100孕酮
釀酒酵母 NGKG寒天基礎(chǔ)培地促卵泡
Enterococcus faecium GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基載脂蛋白A1
黃曲霉 Casman瓊脂培養(yǎng)基α平滑肌肌動蛋白
白蠟多年臥孔 豬副嗜血桿培養(yǎng)基纖連蛋白
東方異擔(dān)子 酪蛋白葡萄糖肉湯I(xiàn)型膠原蛋白
血桿 支原體培養(yǎng)基盤狀結(jié)構(gòu)域受體家族成員2
雞腿173 EG培養(yǎng)基球蛋白G
豌豆根瘤 酪蛋白葡萄糖瓊脂球蛋白M
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
