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產品名稱 | |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | BJ-X97098 |
商品屬性：
名稱 小鼠淋巴管內皮細胞 2.組織來源：淋巴管 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠淋巴管內皮細胞分離自淋巴管組織；淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似，但管徑較細，管壁較薄，瓣膜較多且發達，外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下，常與淺靜脈伴行，收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行，收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中，通常經過一個或多個淋巴結，從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應。當局部感染時，細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞（LEC）是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮，是構成淋巴管壁的主要結構，參與維持體液平衡，調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸，在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明，LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用，而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能：①調節體液、蛋白和組織壓力平衡；②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化：①囊腫型淋巴管瘤；②淋巴管炎；③淋巴結核。 5.方法簡介： ()實驗室分離的小鼠淋巴管內皮細胞采用消化法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： ()實驗室分離的小鼠淋巴管內皮細胞經VEGFR3免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M023 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25% 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒現貨供應
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小鼠淋巴管內皮細胞Grapevine Fanleaf Virus(GFLV)葡萄扇葉病毒RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NFkB p100/p52 細胞核因子p100/p52k基因結合核因子抗體 規格: 0.1ml
Lignum aquilariae resinatum沉香PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周EDNRA 內皮素受體A抗體 規格: 0.1ml
Serratia marcescens粘質沙雷LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周BRMS-1 轉移抑制基因1抗體 規格: 0.1ml
Corynebacterium spp.棒桿通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周VMAT2 腦單胺類神經遞質轉運蛋白抗體 規格: 0.2ml
Fructus ligustri lucidi女貞子染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Syntrophins/SNTA1/Syntrophin Alpha1 神經肌肉接蛋白SNTA1抗體 規格: 0.2ml
Porcine Endogenous Retrovirus(PERV)豬內源性逆轉錄病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結構維持蛋白質１抗體 規格: 0.1ml
Staphylococcus equorum馬胃葡萄球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HEY2 轉錄因子HEY2蛋白抗體 規格: 0.2ml
Radix stemonae百部LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CCDC40 卷曲螺旋結構域蛋白40抗體 規格: 0.2ml
Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)禽皰疹病毒通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周NIPP1/ARD1 核抑制蛋酸1抗體 規格: 0.2ml
Fowlpox Virus(FPV)雞痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RNF122 環指蛋白122抗體 規格: 0.2ml
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
