檢測elisa試劑盒標(biāo)本的處理方法

檢測elisa試劑盒標(biāo)本的處理方法：
（1）血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
（3）尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心，胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（5）組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量，加入一定量的PBS，PH7.4，用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆茫瑯?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。
操作步驟：
1. 加規(guī)范品：在酶標(biāo)包被板上設(shè)規(guī)范品孔，順次參加不一樣濃度的規(guī)范品50ul(主張每個(gè)濃度做2個(gè)平行孔)
2. 加樣：別離設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其他各步操作一樣)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，悄悄晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗刷：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗刷液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：除空白孔外每孔參加酶標(biāo)試劑50μl。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗刷：操作同5。
9. 顯色：每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震動混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反響(此刻藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA試劑盒    ，英文名：    HSP90αA1 ELISA Kit
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