使用不同類型液相色譜柱的優(yōu)缺點(diǎn)

　　高效液相色譜(HPLC)和超高效液相色譜(UHLPC)是兩種的液相色譜技術(shù)。高效液相色譜和UHPLC有一個(gè)填充在色譜柱中的固定相，液體流動(dòng)相通過色譜柱。感興趣的組分根據(jù)極性進(jìn)行分離，選擇的色譜柱和流動(dòng)相取決于用于分析的色譜方法。
       
　　根據(jù)填料和顆粒技術(shù)，HPLC和UHLPC色譜柱可分為不同的類別。根據(jù)要分離分析的內(nèi)容，每個(gè)列類別都有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。


　　全孔色譜柱


　　多孔球形二氧化硅顆粒廣泛用于高效液相色譜和UHPLC。多孔顆粒像海綿一樣工作，當(dāng)它們與固定相相互作用并導(dǎo)致分離時(shí)，樣品擴(kuò)散進(jìn)出孔隙。

　　使用全多孔色譜柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是：


　　優(yōu)勢(shì)


　　提供多種固定相。
　　高機(jī)械強(qiáng)度
　　良好效率
　　適用于較高的pH值


　　劣勢(shì)


　　二氧化硅在pH  7.5以上的溶解度
　　pH值小于1.5時(shí)鍵的水解
　　殘留的硅烷醇活性將導(dǎo)致峰拖尾。
　　多孔色譜柱的一些缺點(diǎn)可以通過改性來克服。硅氧烷橋可以被硅氧烷橋如乙烷鍵取代，以延長色譜柱在較高pH值下的使用壽命。


　　核殼柱


　　核殼色譜柱包含核殼顆粒，也稱為表面多孔顆粒。色譜柱具有內(nèi)部固體二氧化硅不可滲透的核心，該核心被形成外殼的外部二氧化硅多孔層包圍。多孔顆粒和核殼顆粒之間的一個(gè)很大的區(qū)別是擴(kuò)散僅發(fā)生在顆粒的多孔外層，而不是整個(gè)顆粒。


　　使用核殼色譜柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是：


　　優(yōu)點(diǎn)


　　柱長，柱效更高。
　　快速分析時(shí)間
　　與全多孔顆粒相比，靈敏度更高。


　　劣勢(shì)


　　方法轉(zhuǎn)移可能很耗時(shí)。
　　需要能在高壓下工作的特殊儀器。


　　整體柱


　　種色譜柱是整體柱。整體式色譜柱由單個(gè)多孔硅膠或有機(jī)聚合物制成，而不是許多小硅膠顆粒。單棒具有明確的中孔和大孔結(jié)構(gòu)。大孔類似于顆粒填充柱的間隙體積。大孔決定了柱子的滲透性。整體柱的中孔位于二氧化硅顆粒的表面或二氧化硅骨架中。

　　使用整體柱的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是：

　　優(yōu)勢(shì)

　　高孔隙率導(dǎo)致低壓
　　只需要少量的樣品制備。
　　微孔結(jié)構(gòu)可以直接注射。
　　適用于臟樣品。
　　不會(huì)因?yàn)閾Q床而不穩(wěn)定。


　　劣勢(shì)


　　可用的固定相不多
　　不如全多孔色譜柱有效。
　　存在已知的再現(xiàn)性問題。