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    PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準 pcr儀溫度校準

    來源:上海智與懋檢測儀器設備有限公司   2025年07月18日 11:19  

    PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準 pcr儀溫度校準

    在分子生物學實驗室中,PCR儀被譽為基因研究的“心臟”,其溫度控制的精確度直接決定了實驗結果的可信度。一次錯誤的溫度循環(huán)可能導致假陰性或假陽性結果,甚至使數(shù)天的實驗功虧一簣。

    PCR技術通過精確的溫度循環(huán)實現(xiàn)DNA擴增,每個循環(huán)包括變性、退火和延伸三個階段,溫度控制的微小偏差都會導致擴增效率降低甚至失敗。

    《JJF1527-2015聚合酶鏈反應分析儀校準規(guī)范》明確要求對PCR儀的溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率等關鍵參數(shù)進行定期校準1。實驗證明,僅0.5℃的溫度偏差就可能導致擴增效率下降20%,使定量結果**不可靠。

    校準規(guī)范

    《JJF1527-2015聚合酶鏈反應分析儀校準規(guī)范》中提出對聚合酶鏈反應分析儀的計量特性包括溫度示值誤差、溫度均勻性、平均升溫速率、平均降溫速率、樣本示值誤差和樣本線性。校準裝置包括精密溫度傳感器(通常為15個)和數(shù)據(jù)采集分析模塊,測溫范圍0-120℃,不確定度小于等于0.1℃。

    如何判定PCR儀

    (一)、溫度準確性

    溫度準確性是PCR儀重要的性能指標,如溫度準確性低可直接造成非特異性擴增,甚至是錯誤的擴增結果,造成假陽性和假陰性。
    市場上各家廠商考核基因擴增儀(PCR儀)性能的主要指標,一般廠家的企業(yè)指標為±0.5℃,一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度準確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準確度進行測試。校準實驗平均溫度的計算公式為:I—參加檢測的溫度探頭序號;n—參加檢測的溫度探頭的數(shù)量

    (二)、溫場均勻性

    由于PCR儀加熱不均勻,導致PCR儀上各孔存在一定溫差。造成試驗結果偏差。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區(qū)域,所以均勻性為PCR儀重要的性能指標。一般廠家的企業(yè)指標規(guī)定均勻性為±0.5℃,一些性能較好的產(chǎn)品可以實現(xiàn)的溫度均勻度為±0.3℃。校準實驗時,通過選取孔板中16個特殊反應位置來測量溫度,并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值。

    (三)、升降溫速率

    PCR擴增產(chǎn)物數(shù)量的多少決定了PCR的效率。為了在短時間內(nèi)獲得盡可能多的產(chǎn)物,需要儀器在升降溫段具有按照預設升降溫速率快速升溫和降溫的能力(max-升溫速率達15~20℃)。一個完整的PCR過程,是由若干個升溫→恒溫→降溫循環(huán)構成的。因為“變性”,“退火”和“延伸”3個階段是必須要***的。因此,只有使升降溫的過程盡可能地迅速,才能縮短每個PCR循環(huán)以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業(yè)指標規(guī)定升溫速率為±3℃/sec。
    儀器校準實驗時,升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間;降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間。

    (四)、max-超調(diào)溫度

    超調(diào)溫度過大同樣會對試驗產(chǎn)生影響,所以校準實驗時,需要計算max-超調(diào)溫度和平均超調(diào)溫度。

    PCR儀溫度檢定系統(tǒng) PCR儀升降溫速率均勻性校準 pcr儀溫度校準:

    pcr儀溫度校準裝置是合肥智測電子有限公司自主研發(fā)的針對PCR儀溫度測試和校準應用的專業(yè)性、系列化產(chǎn)品,符合國標《JJF 1527-2015 聚合酶鏈式反應分析儀校準規(guī)范》。

    智測電子pcr儀溫度校準裝置符合《JJF1527-2015聚合酶鏈反應分析儀校準規(guī)范》,由精密測溫探頭、高精度測溫儀1611A和數(shù)據(jù)采集軟件組成。產(chǎn)品采用創(chuàng)新的一體化設計,在滿足高精度溫度采集的同時輕巧便攜,可對國內(nèi)外PCR儀器廠商不同型號、不同孔數(shù)(384/96/60/48/32/16/8/單孔等)的PCR儀器進行溫度實時采集和校準,滿足計量校準機構、生物實驗室、儀器廠商對PCR儀溫度測試和校準的需求。

    智測電子還提供ZCTB系列高精度智能恒溫槽、PCR專用校準等溫塊、二等標準溫度計等裝置可以對測溫探頭進行校準,整套方案保障溫控探頭的精度。ZCTB校準智能恒溫槽滿足國家計量檢定規(guī)程的要求,具有溫度掃描功能、上升和保持功能及自動大功率加熱/制冷控制功能等,有優(yōu)異的溫場穩(wěn)定性和均勻性,升降溫速率快,噪音小。

    產(chǎn)品特點

    1、多路檢測,高速采集。系統(tǒng)配備高精度測溫儀1611A,采集速度可達10ms/通道。

    2、探頭響應速度快,長期穩(wěn)定性佳,符合ITS-90國際標準,均可溯源,滿足規(guī)程JJF1527-2015校準規(guī)范的0.1℃精度要求。

    3、測溫儀支持兩種供電方式,既可充電又可插電,方便實驗室和到現(xiàn)場使用。

    基因擴增儀溫度校準裝置 多通道PCR溫度計

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