戴安液相色譜儀操作及原理

來源：賽默飛色譜及痕量元素分析 2024年11月29日 00:56

戴安液相色譜儀是一種高效、精確的分離和分析化合物的設備，廣泛應用于生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析等領域。以下是戴安液相色譜儀的操作步驟及原理的詳細介紹：

一、操作步驟

1. 操作前準備

流動相配制：根據(jù)所供試品的性質(zhì)、文獻資料或工作經(jīng)驗，按比例配制流動相。并根據(jù)流動相的性質(zhì)選擇合適的濾膜（如0.45um的有機膜或水相膜）對流動相進行過濾，然后進行超聲脫氣10\~15分鐘。

樣品處理：稱取或量取適量的對照品或供試品，用適當?shù)娜軇ㄗ詈檬橇鲃酉嗷蛄鲃酉嗟闹鞒煞郑┻M行充分溶解，使其濃度達到0.1\~1mg/mL（可根據(jù)檢測結(jié)果再調(diào)節(jié)濃度）。并使用合適的濾膜（如0.45um的有機針頭濾膜或水相針頭濾膜）對樣品溶液進行過濾。

色譜柱選擇：根據(jù)樣品的性質(zhì)選擇適當?shù)纳V柱。

2. 開機與儀器設置

打開電源，啟動電腦和液相色譜儀工作站軟件。

旋開泵上的排液閥，設置流動相的比例及流速，沖洗流路中的氣泡。

設置柱溫箱溫度，清洗進樣器。

3. 樣品分析

建立儀器方法和處理方法（或調(diào)用已有的方法）。

打開檢測器（如氘燈），設置波長、采集頻率和時間常數(shù)，監(jiān)視基線直至穩(wěn)定。

樣品通過自動進樣器注入色譜系統(tǒng)，進行分離和檢測。

樣品分析結(jié)束后，關閉檢測器，沖洗色譜柱，并依次關閉泵馬達、工作站、檢測器、柱溫箱、自動進樣器等設備的電源。

二、工作原理

戴安液相色譜儀的工作原理基于色譜技術，具體來說：

流動相：攜帶樣品通過色譜柱的介質(zhì)。在泵的作用下，流動相以穩(wěn)定的流速連續(xù)送入色譜柱系統(tǒng)。

樣品進樣：樣品溶液通過進樣器注入色譜柱系統(tǒng)。進樣器一般采用定量環(huán)或微量注射器，確保進樣量的準確性。

色譜柱分離：色譜柱是液相色譜儀的核心部件，由固定相和載體組成。樣品在流動相的作用下通過色譜柱，不同組分在色譜柱中的吸附和洗脫能力不同，從而實現(xiàn)分離。

檢測器檢測：分離后的各組分依次進入檢測器，檢測器根據(jù)各組分的性質(zhì)將其轉(zhuǎn)化為電信號進行記錄。常見的檢測器有紫外可見光檢測器、熒光檢測器等。

數(shù)據(jù)處理：液相色譜儀配備的數(shù)據(jù)采集和處理系統(tǒng)可以實時記錄各組分的峰形和峰高，并進行積分和歸一化處理。通過對比標準品和樣品的數(shù)據(jù)，可以對組分進行定性分析和定量計算。

三、注意事項

在操作過程中，要時刻注意防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完，避免空泵運轉(zhuǎn)損壞儀器。

流動相應先脫氣以避免產(chǎn)生氣泡影響流量穩(wěn)定性。

溶劑泵的工作壓力不能超過規(guī)定的最高壓力。

長期不用時應用甲醇沖洗各個通道并保持泵的清潔。

色譜柱的保存和使用要遵循一定的規(guī)范以避免降低柱效或破壞固定相。

戴安液相色譜儀是一種功能強大且操作相對簡便的分析設備。通過了解其操作步驟和工作原理以及注意事項，可以更好地利用該設備進行樣品分析和研究。

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