膠體金測(cè)試真菌毒素原理及優(yōu)點(diǎn)

1. 膠體金的特性基礎(chǔ)

• 膠體金是由氯金酸 (HAuCl?) 在還原劑作用下，聚合成一定大小的金顆粒，由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金。膠體金顆粒具有高電子密度的特性，在顯微鏡下可見(jiàn)黑褐色顆粒。

• 它能與生物大分子（如蛋白質(zhì)等）結(jié)合，且結(jié)合后不會(huì)影響生物大分子的生物活性。

2. 免疫反應(yīng)原理

• 當(dāng)樣品中存在真菌毒素時(shí)，真菌毒素會(huì)與膠體金 - 抗體復(fù)合物中的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合檢測(cè)線上的捕獲試劑。由于樣品中的真菌毒素與抗體的親和力，會(huì)導(dǎo)致膠體金 - 抗體復(fù)合物不能有效地被檢測(cè)線上的捕獲試劑捕獲，從而使檢測(cè)線顏色變淺或者不顯色，這表示陽(yáng)性結(jié)果。

• 同時(shí)，在質(zhì)控線（通常是固定抗抗體或其他質(zhì)控試劑的區(qū)域），無(wú)論樣品中是否有真菌毒素，膠體金 - 抗體復(fù)合物中的抗體或者剩余的膠體金 - 抗體復(fù)合物會(huì)與質(zhì)控線上的試劑結(jié)合，顯示出顏色，以表明試紙條檢測(cè)過(guò)程正常。

• 抗原 - 抗體特異性結(jié)合：在膠體金檢測(cè)真菌毒素的體系中，首先會(huì)有針對(duì)真菌毒素的特異性抗體。真菌毒素作為抗原，當(dāng)樣品中含有真菌毒素時(shí)，毒素（抗原）會(huì)與抗體發(fā)生特異性結(jié)合。

• 膠體金標(biāo)記物的作用：將膠體金與特異性抗體結(jié)合形成膠體金 - 抗體復(fù)合物。在檢測(cè)時(shí)，如果樣品中沒(méi)有真菌毒素，膠體金 - 抗體復(fù)合物可以在檢測(cè)區(qū)域（如試紙條的檢測(cè)線）正常移動(dòng)并被捕獲試劑（如固定在檢測(cè)線上的抗抗體或抗原類似物）捕獲，顯示出特定的顏色（如紅色），表示陰性結(jié)果。

• 競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)機(jī)制（以免疫層析試紙條為例）

當(dāng)樣品中存在真菌毒素時(shí)，真菌毒素會(huì)與膠體金 - 抗體復(fù)合物中的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合檢測(cè)線上的捕獲試劑。由于樣品中的真菌毒素與抗體 的親         和力，會(huì)導(dǎo)致膠體金 - 抗體復(fù)合物不能有效地被檢測(cè)線上的捕獲試劑捕獲，從而使檢測(cè)線顏色變淺或者不顯色，這表示陽(yáng)性結(jié)果

• 同時(shí)，在質(zhì)控線（通常是固定抗抗體或其他質(zhì)控試劑的區(qū)域），無(wú)論樣品中是否有真菌毒素，膠體金 - 抗體復(fù)合物中的抗體或者剩余的膠體金 - 抗體復(fù)合物會(huì)與質(zhì)控線上的試劑結(jié)合，顯示出顏色，以表明試紙條檢測(cè)過(guò)程正常

膠體金法的優(yōu)點(diǎn)

1. 操作簡(jiǎn)便

• 膠體金免疫層析法不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備，對(duì)操作人員的專業(yè)要求相對(duì)較低。例如，檢測(cè)過(guò)程可能僅需將樣品滴加到試紙條上，在數(shù)分鐘到數(shù)十分鐘內(nèi)即可觀察結(jié)果，無(wú)需特殊培訓(xùn)就能進(jìn)行操作。

2. 快速檢測(cè)

• 能夠在較短時(shí)間內(nèi)得到檢測(cè)結(jié)果。一般來(lái)說(shuō)，從加樣開(kāi)始到得出結(jié)果，整個(gè)過(guò)程可以在 10 - 30 分鐘內(nèi)完成，這對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)快速篩查、即時(shí)診斷等場(chǎng)景非常適用，如在農(nóng)產(chǎn)品收購(gòu)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)真菌毒素等有害物質(zhì)。

3. 成本較低

• 膠體金免疫層析法的試劑制備相對(duì)簡(jiǎn)單，不需要昂貴的儀器設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)，試紙條等檢測(cè)材料的生產(chǎn)成本也相對(duì)較低。這使得該方法在大規(guī)模篩查、基層檢測(cè)單位以及一些經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)的應(yīng)用中具有成本優(yōu)勢(shì)。

4. 穩(wěn)定性好

• 膠體金標(biāo)記物具有較好的穩(wěn)定性，可以在常溫下保存一定時(shí)間。例如，部分膠體金免疫層析試紙條在常溫下能夠保存數(shù)月甚至一年以上，并且仍能保持較好的檢測(cè)性能，減少了對(duì)冷鏈等特殊保存條件的依賴。

5. 直觀結(jié)果

• 檢測(cè)結(jié)果以試紙條上的顏色變化來(lái)顯示，直觀易懂。例如，在檢測(cè)線上出現(xiàn)特定顏色條帶表示陰性結(jié)果，顏色條帶缺失或變淺表示陽(yáng)性結(jié)果，即使是非專業(yè)人員也能夠較為容易地判斷結(jié)果。

6. 特異性強(qiáng)

• 基于抗原 - 抗體特異性結(jié)合的原理，對(duì)目標(biāo)物質(zhì)具有高度特異性。只要抗體的特異性良好，就能夠準(zhǔn)確地識(shí)別目標(biāo)真菌毒素、病原體或其他生物標(biāo)志物等，減少假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。