什么是分光光度法？

來源：泰州市華晨儀器有限公司 2022年11月17日 09:29

分光光度法是根據(jù)物質(zhì)的吸收光語及光的收收定律，對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析的一種方法，當(dāng)光照射浴液時(shí)，當(dāng)光子的能量（hv)與被照射物質(zhì)的基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差（DE)相等時(shí)，就能被吸收，不同物質(zhì)的基態(tài)和激發(fā)態(tài)的能量之差不等，因此，吸收光子的能量也不同，即吸收光的波長不同，這就是物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收。物質(zhì)選擇性的吸收某種顏色的光，則呈現(xiàn)的是照收光的互補(bǔ)色。以入射光的波長（l）為橫坐標(biāo)，溶液的吸光度（A）為縱坐標(biāo)畫出的曲線，即吸收光譜，吸收光語中吸光度的波長，為吸收波長，用/ms表示。

分光光度法測(cè)定物質(zhì)含量的依據(jù)是Lambert-Beer定律（朗伯-比爾定律），即A=Kbc

式中，A為溶液的吸光度：c為溶液的濃度；b為液層厚度。

定量測(cè)定時(shí)，常用的定量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法、比吸光系數(shù)比較法以及差示分光光度法。它們各有其適用的范圍。由于許多物質(zhì)在可見光區(qū)無特征吸收，而在近紫外(200~400nm)處有特征吸收，故需用紫外光為光源進(jìn)行測(cè)定。

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