關(guān)于血清的這些知識，你了解嗎？

• 什么是血清

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因ZI后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

• 血清在細胞培養(yǎng)中的作用

血清的成分多樣，可以給細胞提供：

1. 基本營養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、脂類物質(zhì)、無機物、核酸衍生物等細胞生長必需的物質(zhì)；

2. 激素：胰島素、促生長激素、類固醇激素如睪酮和孕酮、腎上腺皮質(zhì)激素等。

3. 生長因子：表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、血小板生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等；

4. 結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起著重要作用，它能攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵離子，白蛋白攜帶維生素、激素等；

5. 促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷；

6. 蛋白酶抑制劑：中和某些細胞(如內(nèi)皮細胞等)釋放的蛋白酶，從而對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用；

7.血清含有的一些微量元素和離子在代謝解毒中起重要作用，如SeO₃，硒等；

8.血清蛋白使血清具有一定的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，如懸浮培養(yǎng)攪拌時保護細胞。

• 常用的血清

目前常用的血清有胎牛血清、新生牛血清和小牛血清。

以上三種血清中胎牛血清的品質(zhì)ZUI高，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少，因此價格也最高。

• 血清的使用與選擇

血清的使用濃度一般在5%~20%，常用是10%。

有些細胞需要胎牛血清才能生長，而有些細胞有小牛血清就能生長。因此，要根據(jù)具體用途與需要選擇合適的血清。

• 血清的儲存與解凍

1.儲存：建議將血清儲存在-5℃~-20℃（HyClone胎牛血清建議儲存在-10℃）。注意：建議不要將血清儲存在-80℃中！（因為儲存在-80℃，解凍時巨大的溫差會使血清產(chǎn)生更多的沉淀。）

2.解凍：不建議于4℃過夜解凍，也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍，因為若血清沒有混勻，底部的蛋白會變性形成沉淀。

血清解凍的方法（三步法）如下：

注：在水浴過程中，血清要*浸入水中，同時在融化過程中要慢慢搖動瓶身混勻血清，但在搖動中盡量不要產(chǎn)生泡沫。

血清在解凍后，可以根據(jù)實驗需求分裝成單次用量，密封好后立即放回-20℃冰箱繼續(xù)儲存以供進一步使用，這樣可以有效避免反復凍融的問題。

• 血清出現(xiàn)沉淀或絮狀物質(zhì)的原因

1. 2-8℃長時間儲存。

2. 解凍過程中未混勻。

3. γ-輻照：不會損害血清的理化特性或細胞培養(yǎng)性能。

4. 反復凍融：使血清脂蛋白發(fā)生變性造成渾濁。

5. 血清中殘留的纖維蛋白原：殘留的纖維蛋白原在解凍后會轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，過量的纖維蛋白在血清中表現(xiàn)為可見的絮狀物質(zhì)。

去除方法：400 g離心。不建議直接過濾血清以去除絮狀物質(zhì)，因為過濾器可能會堵塞或者截留重要的蛋白質(zhì)。

6. 磷酸鈣：磷酸鈣在血清中通常呈云狀，并且在倒置顯微鏡下觀察會看到可以自由移動的小黑點，因此磷酸鈣沉淀通常被誤認為是微生物污染物。

檢測是否污染方法：將1 mL待測血清直接倒在細菌瓊脂平板上，在37℃培養(yǎng)之后觀察菌落的生長情況。在油鏡（放大1000倍）下觀察革蘭氏染色，以確定是否受到污染。不建議用37℃孵育的血清直接檢測無菌性，因為在37℃孵育之后，血清中的磷酸鈣沉淀物會增加。

• 國內(nèi)購買胎牛血清的現(xiàn)狀

難辨真假，產(chǎn)地不實，有的甚至都不是牛血清。非正規(guī)胎牛血清產(chǎn)品會直接影響實驗的結(jié)果和穩(wěn)定以及數(shù)據(jù)的真實性，對實驗造成很大的影響。因此，購買血清產(chǎn)品時一定要選擇可靠的產(chǎn)品！

北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供來源可靠，產(chǎn)地可查的HyClone、Omnimabs以及澳申生物的血清產(chǎn)品。

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2.國際先JIN生產(chǎn)工藝：3級0.1 μm過濾，標準凈化車間，萬級環(huán)境下罐裝，全程低溫控制系統(tǒng)；

3.國內(nèi)雙重質(zhì)檢，全面理化、微生物檢測，不含BVD\PI3\IBR\RABV\BAV BRSV\BTV等牛病病毒。