鑒定菌落如此高效，PCR降本不是說(shuō)說(shuō)而已

如果說(shuō)PCR，也許只有研究人員比較熟悉，但如果說(shuō)起核酸，相信沒(méi)有人不知道。

PCR又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ，它是一種放大擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)手段 ，被廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域，如核酸檢測(cè)、病毒檢測(cè)、親子鑒定等。獲得一小片組織 ，提取DNA再進(jìn)行PCR擴(kuò)增、比對(duì)，便可以獲得相應(yīng)的數(shù)據(jù)。

菌落PCR

常規(guī)PCR擴(kuò)增需要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、質(zhì)粒制備等多步操作后才能進(jìn)行基因擴(kuò)增，操作繁瑣耗時(shí)較長(zhǎng)，同時(shí)在反復(fù)的操作中DNA量損失也較大，產(chǎn)率較低。

菌落PCR與我們通常的普通DNA的PCR的不同在于，直接以單個(gè)菌作為模板。是一種可以快速鑒定菌落是否為含目的質(zhì)粒的陽(yáng)性菌落。操作簡(jiǎn)單，快捷，陽(yáng)性率較高，在轉(zhuǎn)化鑒定中較常見(jiàn)。

菌落PCR（Colony PCR）可不必提取基因組DNA，不必酶切鑒定，直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，大大節(jié)約了時(shí)間和成本。

菌落PCR如何操作？

菌落PCR（Colony PCR）篩選基本步驟：

1. 單菌落挑??；

2. 菌落PCR反應(yīng)；

3. 瓊脂糖凝膠電泳；

4. 判斷陽(yáng)性克隆并測(cè)序；

常規(guī)操作過(guò)程是用小槍頭挑取單個(gè)菌落，先在含抗性的培養(yǎng)皿上畫(huà)線，然后蘸取單菌落到畫(huà)線格里，蘸取完將單菌落插入反應(yīng)體系中，進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)。

Bel-Art 菌落復(fù)制工具可以不費(fèi)吹灰之力地完成繁瑣的菌落復(fù)制任務(wù)，增加生產(chǎn)力。Bel-Blotter適合所有類型的96孔板，從平面、v形或圓形的底板轉(zhuǎn)移到0.2ml薄壁PCR板和試管中。只需簡(jiǎn)單地將

Bel-Blotter放置在平板上，針尖就會(huì)吸收液體，每個(gè)針尖可吸收10µl的液體。然后將填充好的Bel-Blotter放入接收介質(zhì)中，無(wú)論是平板孔、雜交膜還是瓊脂即可完成菌落復(fù)制。

Bel-Art 菌落復(fù)制工具

菌落復(fù)制工具由聚碳酸酯制成；易于使用，可高壓滅菌，滅菌后可重復(fù)使用。

應(yīng)用：

可用于復(fù)制重組DNA文庫(kù)、接種菌落雜交過(guò)濾器、PCR、噬菌體分型和其他應(yīng)用。