問答之血清滅活問題

1、問：加到培養基中的血清必須滅活嗎？

答：不是必須的，看做什么實驗了。

2、問：四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎？

答：如果用于培養大多數的腫瘤細胞，血清一般是不需要滅活的，這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養一些表面具有補體受體的細胞，如內皮細胞，血清是需要滅活，一般是56℃，30min。

3、問：我要做滋養細胞培養，胎牛血清要滅活嗎？

答：進口的一般都已滅活，國產的不一定，還是滅活一下再用較安全。

4、問：我用病毒上清轉染細胞，培養用的血清需要滅活嗎？因為血清中可能有些補體和抗體，是不是會影響轉染？我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合，影響轉染，正確嗎？細胞是單核細胞白血病細胞，病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清。為什么要用無血清培養基加病毒孵育幾小時，目的是什么？

答：血清一定要滅活，可以先用無血清培養基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結合過程的干擾，一般是2-6小時，根據細胞的狀態決定。血清不一定需要滅活，滅活的目的是將血清中的補體滅活！這要根據實際情況而定，如果沒有把握那就滅活吧，也不麻煩56度半個小時。

5、問：(1)我買的是杭州四季青的新生牛血清，要滅活嗎？有些說法是需要，有些說直接解凍后就可以加入到培養基中；我配制胰蛋白酶液，用的是D-PBS，有關系嗎？

答：關于血清的熱滅活，是很多人感興趣也存在一定爭議的話題。大多數實驗室將血清的熱滅活還是作為常規來執行，因為有兩個作用，第yi是滅活補體，第二是滅活血清中可能存在的支原體。但是實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響。

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