IEC-18細(xì)胞|大鼠回腸細(xì)胞IEC-18處理步驟

大鼠回腸細(xì)胞,IEC-18細(xì)胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。

這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細(xì)胞生長的空間密度問題。有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞，這樣細(xì)胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候，細(xì)胞形態(tài)基本上就會差

細(xì)胞株說明

1. 細(xì)胞名稱：IEC-18細(xì)胞|大鼠回腸細(xì)胞IEC-18處理步驟

2. 生長特性：貼壁生長

3. 培養(yǎng)條件：RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡

萄糖+ 50umol/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS

4. 傳代比例：1:3-1:6

5. 培養(yǎng)環(huán)境：37℃，5%CO2,95%O2

2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細(xì)胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實(shí)是有一個方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞，如果細(xì)胞形態(tài)不好，（或者細(xì)胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作：

大鼠回腸細(xì)胞,IEC-18細(xì)胞首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細(xì)胞我們只吹打，不消化的）

其次，把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入*培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。

如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。老化的會比較多，對后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題