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    Elisa實(shí)驗(yàn)背景深全部呈有色原因及解決方案

    來(lái)源:上海研伴實(shí)業(yè)有限公司   2018年08月28日 22:52  

    Elisa實(shí)驗(yàn)中,背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2)

    根據(jù)技術(shù)分析,可能存在的原因有一下幾條:

     

    1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留

      解決辦法:洗液準(zhǔn)確配制;充分洗滌,靜置15秒,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染。

     

    2、底物污染,未避光保存,出現(xiàn)顏色

    解決辦法:棄去底物,重新配置

     

    3、樣品稀釋液污染

      解決辦法:棄去稀釋液,重新配置

     

    4、吸頭重復(fù)使用,未洗凈或消毒不*

      解決辦法:吸頭盡可能一次性使用

     

    5、不正確的孵育時(shí)間,溫度(尤其是底物孵育的時(shí)間)

      解決辦法:為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。*按照說(shuō)明書(shū)要求

     

    6、偶聯(lián)抗體(streptavidin-HRP)濃度過(guò)高

      解決辦法:按照說(shuō)明書(shū)調(diào)整到合適的濃度

     

    7、ELISA板子不正確的貯存

      解決辦法:酶標(biāo)板貯存于2-8 ℃;使用結(jié)合力低點(diǎn)的Elisa板

     

    8、沒(méi)有正確封閉

      解決辦法:在標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中加入動(dòng)物蛋白或延長(zhǎng)封閉時(shí)間

     

    9、樣本溶血嚴(yán)重

      解決辦法:建議使用非溶血或輕微溶血樣本,嚴(yán)重溶血樣本會(huì)導(dǎo)致背景偏高。

     

    上海極威生物科技有限公司長(zhǎng)期供應(yīng)各類elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生物試劑,培養(yǎng)基,化學(xué)試劑,科研細(xì)胞株,試驗(yàn)服務(wù),進(jìn)口品牌試劑等,專業(yè)為科研機(jī)構(gòu)提供更好用的科研試劑,期待您的咨詢,我司將竭誠(chéng)為您服務(wù)!

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