WB高性價比GAPDH內(nèi)參抗體選擇原則

      在WesternBloting實(shí)驗中，也許存在總蛋白濃度測定不，或許蛋白質(zhì)樣品在電泳前上樣時產(chǎn)生的樣品間的操作差錯；這些差錯可以經(jīng)過測定每個樣品中實(shí)際轉(zhuǎn)到膜上的內(nèi)參，比方內(nèi)參GAPDH的含量來進(jìn)行校對。當(dāng)然除了GAPDH抗體，β-Actin抗體、β-Tubulin抗體等也是zui常見的內(nèi)參抗體。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參加糖酵解的一種關(guān)鍵酶，由4個30-40kDa的亞基構(gòu)成，分子量146kDa，檢查條帶大約在36kDa。GAPDH基因簡直在所有組織中都高水平表達(dá)，廣泛用作Western blot蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)化的內(nèi)參。

    選擇合適的GAPDH抗體顯得尤為重要，首先GAPDH的WB檢測條帶大約為36kDa，因此對于一些待檢測分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤為合適。一般來說，國產(chǎn)的抗體在質(zhì)量穩(wěn)定性、效價等方面存在不足，但是進(jìn)口品牌如Abcam、Millipore、CST等價格偏高，一般在￥3000/100ul左右。下面我們?yōu)槟扑]三款GAPDH*抗體。Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody（貨號A01020）是小鼠源的單抗，其效價很高，廠商推薦的WB起始稀釋比率為1:1000，實(shí)際應(yīng)用過程中，有使用1:10000或更高的報告，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于此稀釋比率，說明其免疫效價很高，另外，其檢測種屬也很多，包括人、牛、豬、小鼠、大鼠等。上圖為Abbkine的Anti-GAPDH MonoclonalAntibody（貨號A01020）在不同細(xì)胞系內(nèi)WB的檢測結(jié)果。

    Abbkine的HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) （貨號A01025）則是一款HRP直標(biāo)的小鼠源單克隆GAPDH抗體，由于是HRP直接標(biāo)記，因此不會受到二抗的干擾，在一些IP應(yīng)用中非常合適，可有效排除IP-WB時的重鏈干擾。下圖為Abbkine的GAPDH Monoclonal Antibody（貨號A01020）抗體在石蠟包埋、福爾馬林固定的切片上的應(yīng)用。

    更多GAPDH內(nèi)參抗體以及其他如Actin、Tubulin等其他內(nèi)參抗體，請。

    Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌，目前已引入中國，艾美捷科技作為作為總代理，將為客戶提供的常規(guī)免疫學(xué)試劑，如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗，抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時我們作為多家品牌的的區(qū)域代理，能為您提供系列的實(shí)驗室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣，請致電到武漢艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗解決方案。