PCNA核內參抗體WB實驗的內參解決方案

 增殖細胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系統性紅斑狼瘡）患者的血清中發現并命名，因其只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質，在細胞核內合成，并存在于細胞核內，為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細胞核內穩定表達，因此其抗體被廣泛應用于細胞核蛋白的內參抗體。

如何選擇合適的細胞核內參抗體？

常用的細胞總蛋白質內參有GAPDH和細胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本，則需要特別的植物Actin蛋白作為內參。當實驗樣品中只是核蛋白，而不是細胞總蛋白提取液時，可以用組蛋白H（Histone H），或者增殖細胞核抗原（PCNA）等為核內參抗體。除了這些，其它常見的核蛋白內參還有K70, K80, Lamin A和B，在一些文獻報道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的問題是核蛋白內參的選擇需要考慮實際的試驗環境，比如在涉及細胞增殖相關試驗中，c-Jun由于自身表達變化就不適合做內參；而在凋亡實驗時，TBP、Lamin等也不適合作為內參。

另外，我們還需要根據目的蛋白的大小選擇合適的核內參，我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分 子量相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參。PCNA的檢測分子量大約在28kD，而Histone H3的檢測條帶大約在18kD，因此PCNA比較適合用于檢測目標蛋白在較大的WB實驗，而Histone H3則不適合用于13kD-23kD大小的目的蛋白內參。另外，雖然PCNA是zui合適的核內參抗體之一，但是在某些條件下，一些影響增殖的因素會導致樣品間PCNA含量的變化，就不適合作為內參。

一開始購買Abbkine的PCNA抗體是用來做WB的，效價挺高的。后來我們使用了組織塊作為樣品做共定位，我嘗試使用該抗體對PCNA做定位，做免疫組織化學，WB和IHC效果都很不錯。——中南民族大學生科院一客戶

另外，我們還需要考慮自己的需要，特別是實驗應用上的需要。一般來說，應用類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大，而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl PCNA抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000，zui終使用液相當于500ml），要比效價低的1ml的PCNA抗體（假如WB檢測的稀釋比率是 1:200，zui終使用液相當于2ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的PCNA抗體？

供應PCNA抗體的品牌是比較多的，象Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling、Sigma，甚至于Millipore、R&D、Novus、BD等都有相應的產品。下面是幾個進口品牌的簡單比較：

另外，一些國內的供貨商也能提供分裝的PCNA抗體，但是在品牌和質量保障上都有不足。國產分裝的PCNA抗體在質量穩定性上有不足，并且經過分裝以后，其效價也有損失。而原產于國內實驗室的PCNA抗體有些具有較好的檢測活性，但是在應用類型上有差距，并且在批次之間的穩定性上較難控制，而國內僅有的少量原產抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高，同時也是*品牌的PCNA核內參抗體，那Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的PCNA核內參抗體Anti-PCNA Monoclonal Antibody (1D7)（貨 號A01040）。

該抗體單克隆抗體，克隆號為1D7。其抗原為人PCNA蛋白中兼具特異性和保守的一段序列，可用于小鼠、人以及大鼠樣本的WB內參。另外，該抗體的效價非常高，WB實驗推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000，甚至有客戶報告更高的稀釋比率。

該PCNA內參抗體免疫組織化學的效果也很不錯，是一款非常適合做免疫組化對細胞骨架進行染色定位的抗體產品。另外，也有客戶報告使用該抗體用于組織的熒光染色，也取得了意外的效果。

Abbkine還提供大包裝1ml以及更大規格定制的PCNA標簽抗體，非常適合經常進行內參驗證或校準的免疫學實驗需求。為方便客戶的使用， 上述產品，Abbkine均在中國備有現貨。Abbkine針對中國市場，提供化的產品質量追蹤和售后服務以及保障，如果您在使用過程中有任何問題， 請直接與其當地代理商艾美捷科技有限公司。

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