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  • 北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
    初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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    化學(xué)試劑
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    Serochem
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    凝膠過(guò)濾層析(SEC)的蛋白純化方法是怎樣的呢?

    時(shí)間:2023/9/18閱讀:1562
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    凝膠過(guò)濾層析(SEC)的蛋白純化方法是怎樣的呢?

    凝膠過(guò)濾層析又稱(chēng)為分子篩或排阻層析,是利用蛋白分子大小和形狀的不同進(jìn)行分離。以惰性細(xì)顆粒基質(zhì)作為層析柱填料,由于液體的擠壓,大分子物質(zhì)因無(wú)法進(jìn)入細(xì)顆粒的微孔中而隨著液體從細(xì)顆粒間的縫隙流出,而小分子因進(jìn)入細(xì)顆粒基質(zhì)內(nèi)微孔運(yùn)動(dòng)速度,保留時(shí)間長(zhǎng),比大分子物質(zhì)流出緩慢而分離。凝膠過(guò)濾的層析樣品不與層析柱料結(jié)合,因此,緩沖液成分不直接影響分辨率。


    凝膠層析的固定相是凝膠。凝膠是一種不帶電荷的具有三維空間多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物質(zhì),凝膠的每個(gè)顆粒內(nèi)部都具有很多細(xì)微的小孔,如同篩子一樣。

    SEC 1.png

    特點(diǎn):


    1.通常多用于最后一步純化的有效方法;


    2.整個(gè)SEC過(guò)程都只使用一種溶劑;


    3.低聚物、去折疊的蛋白分子和缺失蛋白都可以在逐漸置換緩沖液的過(guò)程中與結(jié)構(gòu)完整的天然蛋白質(zhì)分子分離開(kāi);


    4.SEC可使用溶劑種類(lèi)更多,所用的緩沖鹽也更少,比透析的緩沖液置換過(guò)程更快更可靠;


    5.介質(zhì)的類(lèi)型和柱子的長(zhǎng)度對(duì)蛋白質(zhì)的SEC分離的分辨率有很大的影響;


    6.根據(jù)待分離蛋白質(zhì)分子的分子量和分離條件市場(chǎng)上有很多種排阻范圍的介質(zhì)可選。

    以上就是關(guān)于凝膠過(guò)濾層析(SEC)的蛋白純化方法的介紹,如果您有更多其他關(guān)于蛋白純化方法的問(wèn)題,請(qǐng)咨詢(xún)百奧創(chuàng)新客服!

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