RKO（人結(jié)腸癌細(xì)胞）* 返回列表頁

產(chǎn)品名稱：RKO(人結(jié)腸癌細(xì)胞)*
英文名稱：RKO(human colon adenocarcinomacells)
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號：FS-X0754
RKO(人結(jié)腸癌細(xì)胞)*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
RKO(人結(jié)腸癌細(xì)胞)*收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成素4    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶性肌球蛋白重鏈1    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人熱休克因子1    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活性肽酶抑制劑    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白輕鏈1    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit  人缺血修飾白蛋白    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit  人8-異構(gòu)前列腺素F2α    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit  人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit  人α平滑肌肌動蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit  人α橫紋肌肌動蛋白    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
cT(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  人心肌特異性肌鈣蛋白T    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit  人肌球蛋白重鏈    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit  人熱休克蛋白27    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ANG(Human angiostatin) ELISA Kit  人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit  人心型脂肪酸結(jié)合蛋白    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腦型脂肪酸結(jié)合蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
RKO(人結(jié)腸癌細(xì)胞)*BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人血管舒緩激肽    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白輕鏈    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-輔肌動蛋白3    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應(yīng)蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營養(yǎng)素1    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍(lán)蛋白    進(jìn)口/原裝