IV型膠原酶（含100mL酶解緩沖液）保存 返回列表頁

產(chǎn)品名稱：IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)保存
英文名稱：Type IV collagenase(enzymebuffer containing100mL)
規(guī)格：10mL
產(chǎn)品貨號：FS-X0545
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)保存的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉?/a>。
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)保存培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

*醚內(nèi)酯    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111568-200603    規(guī)格:    20mg/支
異鼠李素-3-O-新*    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111571-200604    規(guī)格:    20mg/支
遠志皂苷元    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111572-200702    規(guī)格:    20mg/支
香蒲新苷    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111573-200503    規(guī)格:    20mg/支
紫丁香苷    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111574-200502    規(guī)格:    20mg/支
虎杖苷（白黎醇苷）    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111575-200502    規(guī)格:    20mg/支
L-*    進口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量：    111576-200201    規(guī)格:    20mg/支
*    進口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量：    111577-    規(guī)格:    20mg/支
L-羥*    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111578-200201    規(guī)格:    20mg/支
降香揮發(fā)油    進口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量：    111579-200201    規(guī)格:    20mg/支
甲基*    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111580-200503    規(guī)格:    20mg/支
紫菀酮    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111581-200403    規(guī)格:    20mg/支
青陽參苷元    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111582-200201    規(guī)格:    20mg/支
二氫歐山芹醇當歸酸酯    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111583-200402    規(guī)格:    20mg/支
西紅花苷-I    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111588-200501    規(guī)格:    20mg/支
西紅花苷-Ⅱ    進口/國產(chǎn)    英文名稱        含量：    111589-    規(guī)格:    20mg/支
重樓皂苷 I    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111590-200402    規(guī)格:    20mg/支
重樓皂苷 Ⅱ    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111591-200402    規(guī)格:    20mg/支
重樓皂苷 Ⅵ    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111592-200402    規(guī)格:    20mg/支
重樓皂苷 Ⅶ    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111593-200402    規(guī)格:    20mg/支
總銀杏酸（套）    進口/國產(chǎn)    英文名稱    鑒別    含量：    111594-200603    規(guī)格:    20mg/支
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)保存黃芩素    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111595-200905    規(guī)格:    20mg/支
胡黃連苷-Ⅱ    進口/國產(chǎn)    英文名稱    含量測定    含量：    111596-200402    規(guī)格:    20mg/支
*酯甲    進口/國產(chǎn)    英文名稱    TLV掃描法     含量測定    含量：    111597-200503    規(guī)格:    20mg/支