大鼠淋巴管內皮細胞*培養基操作方法 返回列表頁

產品名稱：大鼠淋巴管內皮細胞*培養基操作方法
英文名稱：Complete mediumratlymphatic endothelial cells
規格：100mL
產品貨號：FS-X0334
大鼠淋巴管內皮細胞*培養基操作方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
大鼠淋巴管內皮細胞*培養基操作方法收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的*培養基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得。
培養操作流程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備F-12K培養基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

毛蕊異黃酮    進口/國產    英文名稱        含量：    Calycosin    規格:    20mg/支
毛蕊異黃酮苷    進口/國產    英文名稱    毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷;毛蕊異黃酮葡萄糖苷    含量：    Calycosin-7-O-β-D-glucoside    規格:    20mg/支
京尼平    進口/國產    英文名稱        含量：    Genipin    規格:    20mg/支
黃柏堿    進口/國產    英文名稱        含量：    Phellodendrine    規格:    20mg/支
朝藿定A1    進口/國產    英文名稱        含量：    Epimedin A1    規格:    20mg/支
莪術二酮    進口/國產    英文名稱    姜黃二酮; 莪二酮    含量：    Curdione    規格:    20mg/支
氧化槐果堿    進口/國產    英文名稱        含量：    Oxysophocarpine    規格:    20mg/支
楊梅苷    進口/國產    英文名稱    楊梅甙; 五羥基黃酮-3-鼠李糖苷    含量：    Myricetrin    規格:    20mg/支
人參皂苷Ro    進口/國產    英文名稱    竹節參苷V    含量：    Ginsenoside Ro    規格:    20mg/支
灰氈毛忍冬皂苷乙    進口/國產    英文名稱        含量：    Macranthoidin B    規格:    20mg/支
銀杏內酯J    進口/國產    英文名稱    白果苦內酯J    含量：    Ginkgolide J    規格:    20mg/支
特女貞苷    進口/國產    英文名稱        含量：    Specnuezhenide    規格:    20mg/支
京尼平苷酸    進口/國產    英文名稱    梔子酸    含量：    Geniposidic acid    規格:    20mg/支
川續斷皂苷乙    進口/國產    英文名稱        含量：    Dipsacoside B    規格:    20mg/支
山梔苷甲酯    進口/國產    英文名稱        含量：    Shanzhiside methylester    規格:    20mg/支
表告依春    進口/國產    英文名稱    (R)-5-乙烯基-2-惡唑啉硫酮    含量：    Epigoitrin    規格:    20mg/支
大車前苷    進口/國產    英文名稱        含量：    Plantamajoside    規格:    20mg/支
8-O-乙酰山梔苷甲酯    進口/國產    英文名稱        含量：    8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester    規格:    20mg/支
水晶蘭苷    進口/國產    英文名稱    水晶蘭甙    含量：    Monotropein    規格:    20mg/支
大鼠淋巴管內皮細胞*培養基操作方法黃杞苷    進口/國產    英文名稱        含量：    Engeletin    規格:    20mg/支
巴豆苷    進口/國產    英文名稱    異鳥苷    含量：    Crotonoside    規格:    20mg/支
沙苑子苷A    進口/國產    英文名稱        含量：