5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸 返回列表頁

產品名稱：5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸
英文名稱：5-8Fhighly metastaticnasopharyngeal carcinoma cell line
規(guī)格：5×105cells/瓶
產品貨號：FS-X0148
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時與我們取得。
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

 非酶細胞裂解液    英文名稱：    NECDS    規(guī)格:    100 ml        
細胞凍存液    英文名稱：    CFM    規(guī)格:    50 ml        
無血清細胞凍存液    英文名稱：    SF-CFM    規(guī)格:    50 ml        
臺盼藍    英文名稱：    TB    規(guī)格:    50 ml        
磷酸鹽緩沖注    英文名稱：    DPBS    規(guī)格:    500 ml        
*    英文名稱：    HBSS    規(guī)格:    500 ml        
多聚賴氨酸 1 mg/ml    英文名稱：    PLL    規(guī)格:    1 ml        
多聚賴氨酸10 mg/ml    英文名稱：    PLL    規(guī)格:    1 ml        
胎牛血清    英文名稱：    FBS    規(guī)格:    500 ml        
*/*溶液    英文名稱：    P/S    規(guī)格:    5 ml        
*/*溶液    英文名稱：    P/S    規(guī)格:    100 ml        
抗真菌溶液    英文名稱：    AMS    規(guī)格:    50 ml        
抗霉菌溶液    英文名稱：    ABAMS    規(guī)格:    50 ml        
細胞培養(yǎng)超純水    英文名稱：    CCGW    規(guī)格:    500 ml        
肌細胞分離液    英文名稱：    MDS    規(guī)格:    100 ml        
牛腦垂體提取物    英文名稱：    BPE    規(guī)格:    25 mg        
牛腦垂體提取物    英文名稱：    BPE    規(guī)格:    100 mg        
胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x    英文名稱：    ITS    規(guī)格:    10 ml        
左旋*溶液 200 mM    英文名稱：    L-Gue    規(guī)格:    100 ml        
非必需氨基酸 100X    英文名稱：    NEAA    規(guī)格:    100 ml        
纖維粘連蛋白-牛源    英文名稱：    BPF    規(guī)格:    1mg        
I 型膠原細胞檢測試劑盒    英文名稱：    Col    規(guī)格:    48 tests/48 well plate        
纖維母細胞粘附檢測試劑盒    英文名稱：    Fibro    規(guī)格:    48 tests/48 well plate        
MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒    英文名稱：    MTT    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒    英文名稱：    WST    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
細胞衰老檢測試劑盒    英文名稱：    CSA    規(guī)格:    50 tests/53 mm plate        
5-8F 人高轉移鼻咽癌細胞系保存運輸β-半乳糖苷酶比色檢測試劑盒    英文名稱：    GalC    規(guī)格:    50 tests/53 mm plate        
LDH細胞毒性檢測試劑盒    英文名稱：    LDH    規(guī)格:    500 tests/96 well plate        
TUNEL色標法細胞凋亡檢測試劑盒    英文名稱：    TUNEL    規(guī)格:    50 tests/96 well plate        
一氧化氮色標法檢測試劑盒    英文名稱：    NO    規(guī)格:    250 tests/96 well plate        
硝基苯磷酸鈉（pNPP）磷酸酶檢測試劑盒    英文名稱：    pNPP    規(guī)格:    500 tests/96 well plate        
孔雀綠磷酸鹽檢測試劑盒    英文名稱：    MGmP    規(guī)格:    2500 tests/96 well plate        
比色法鈣分析試劑盒    英文名稱：    CCA    規(guī)格:    250 tests/96 well plate        
活/死細胞染色試劑盒    英文名稱：    CSK    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
比色法GAPDH分析試劑盒    英文名稱：    GAPDH    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate