B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片 返回列表頁(yè)

產(chǎn)品名稱：B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片
英文名稱：B16-F10metastatic mouse melanomacells
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0113
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

芍藥苷    英文名稱：    Paeoniflorin    :    23180-57-6    分子式：    C23H28O11    480.46    20mg
芍藥內(nèi)酯苷    英文名稱：    Albiflorin    :    39011-90-0    分子式：    C23H28O11    480.46    20mg
丹皮酚    英文名稱：    Paeonol    :    552-41-0    分子式：    C9H10O3    166.17    20mg
濱蒿內(nèi)酯    英文名稱：    Scoparone    :    120-08-1    分子式：    C11H10O4    206.19    20mg
東莨菪內(nèi)酯    英文名稱：    Scopoletin    :    92-61-5    分子式：    C10H8O4    192.17    20mg
二氫    英文名稱：    Hydrocoumarin    :    119-84-6    分子式：    C9H8O2    148.16    20mg
7-羥基-4-甲基    英文名稱：    4-Methylumbelliferone    :    90-33-5    分子式：    C10H8O3    176.17    20mg
*    英文名稱：    7,8-Dihydroxycoumarin    :    486-35-1?    分子式：    C9H6O4    178.14    20mg
傘形花內(nèi)酯    英文名稱：    7-Hydroxycoumarin    :    93-35-6    分子式：    C9H6O3    162.14    20mg
    英文名稱：     Coumarin     :    91-64-5    分子式：    C9H6O2    146.14    20mg
*    英文名稱：    Norcantharidin    :    5442/12/6    分子式：    C8H8O4    168.15    20mg
斑蝥素    英文名稱：    Cantharidin    :    56-25-7    分子式：    C10H12O4    196.2    20mg
畢靈堿    英文名稱：    (+)-Bicuculline    :    485-49-4    分子式：    C20H17NO6    367.35    20mg
白頭翁皂苷B4    英文名稱：    Anemoside B4    :    129741-57-7    分子式：    C59H96O26    1221.38    20mg
白頭翁素    英文名稱：    Anemonin    :    90921-11-2    分子式：    C10H8O4    192.17    10mg
蝙蝠葛蘇林堿    英文名稱：    daurisoline    :    70553-76-3    分子式：    C37H42N2O6    610.747    10mg
蝙蝠葛堿    英文名稱：    Dauricine    :    524-17-4    分子式：    C38H44N2O6    624.774    20mg
蝙蝠葛氰苷    英文名稱：    Menisdaurin    :    "67765-58-6
"    分子式：    C14H19NO7    "313.13
"    10mg
蝙蝠葛新諾林堿    英文名稱：    Dauricinoline    :    30984-80-6    分子式：    C37H42N2O6    610.747    10mg
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片N,N’-二甲基蝙蝠葛堿碘化物     英文名稱：    N,N’-dimethyldauricine iodide     :        分子式：    "C40H50N2O62+·2I-
"    "908.64
"    10mg
乙酰蝙蝠葛蘇林堿    英文名稱：    O-diacetyldaurisoline     :        分子式：    C41H46N2O8    694.82    10mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ    英文名稱：    Atractylenolide 1    :    73069-13-3    分子式：    C15H18O2    230.3    20mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ    英文名稱：    Atractylenolide II    :    73069-14-4    分子式：    C15H20O2    232.32    20mg
白術(shù)內(nèi)酯III    英文名稱：    Atractylenolide III    :    73030-71-4    分子式：    C15H20O3    248.32    20mg
蒼術(shù)素    英文名稱：    Atractylodin    :    55290-63-6    分子式：    C13H10O    182.22    20mg
蒼術(shù)苷A    英文名稱：    Atractyloside A    :    126054-77-1    分子式：    C21H36O10    448.5    20mg
茅蒼術(shù)醇     英文名稱：    Hinesol    :    23811-08-7    分子式：    C15H26O    222.37    10mg