Hep G2 人肝癌細胞系操作方法 返回列表頁

產品名稱：Hep G2 人肝癌細胞系操作方法
英文名稱：HepG2a human hepatocellular carcinoma cell line
規格：5×105cells/瓶
產品貨號：FS-X0108

Hep G2 人肝癌細胞系操作方法的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Hep G2 人肝癌細胞系操作方法收到后的處理：
1）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
2）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養基，添加6ml本公司附帶的*培養基。
4）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
5）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得。
培養操作流程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備F-12K培養基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

長梗冬青苷    英文名稱：    Pedunculoside    :    42719-32-4    分子式：     C36H58O10     650    20mg
毛冬青酸    英文名稱：    Ilexolic acid    :        分子式：            20mg
*    英文名稱：    Ligustrazine Hydrochloride    :    76494-51-4    分子式：    C8H12N2.xClH    172.65762    20mg
川芎嗪    英文名稱：    Tetramethylpyrazine    :    1124-11-4    分子式：    C8H12N2    136.19    20mg
草質素    英文名稱：    Herbacetin    :    527-95-7    分子式：    C15H10O7    302.237    10mg
臭椿酮     英文名稱：    Ailanthone    :    981-15-7    分子式：    C20H24O7    376.403    10mg
醋戊曲酯     英文名稱：    acevaltrate    :    25161-41-5    分子式：    C24H32O10        10mg
 橙花叔醇    英文名稱：     Nerolidol    :     7212-44-4    分子式：    C15H26O    222.37    20mg
查斯曼寧堿    英文名稱：    Chasmanine    :         分子式：     C25H41NO6    451.6    20mg
川翠定甲    英文名稱：    Bonvalotidine A    :        分子式：    C27H41NO8        20mg
刺囊酸    英文名稱：    Echinocystic acid     :    510-30-5     分子式：    C30H48O4    472.71    10mg
查斯馬寧    英文名稱：    Chasmanine    :    "5066-78-4
"    分子式：    "C25H41NO6 
"    "451.61
"    20mg
粗壯女貞苷N（95%）     英文名稱：    "Ligurobustoside N
"    :        分子式：    "C35H46O18
"    "754.74
"    10mg
催吐蘿芙木定    英文名稱：    Mitoridine    :    3911-19-1    分子式：    C25H41NO6    "322.41
"    10mg
車葉草苷    英文名稱：    ASPERULOSIDE    :        分子式：            20mg
大車前苷    英文名稱：    Plantamajoside    :    104777-68-6    分子式：    C29H36O16    640.2    20mg
高車前苷    英文名稱：    Homoplantaginin    :    17680-84-1    分子式：    C22H22O11    462.4    10mg
高車前素    英文名稱：    Hispidulin    :    1447-88-7    分子式：    C16H12O6    300.26    20mg
大黃素甲醚    英文名稱：    Emodin-3-methyl ether    :    521-61-9    分子式：    C16H12O5    284.26    20mg
大黃酸    英文名稱：    Rhein    :    478-43-3    分子式：    C15H8O6    284.22    20mg
大黃酚    英文名稱：    Chrysophanic acid    :    481-74-3    分子式：    C15H10O4    254.24    20mg
大黃素    英文名稱：    Emodin    :    518-82-1    分子式：   Hep G2 人肝癌細胞系操作方法 C15H10O5    270.24    20mg
雙醋瑞因    英文名稱：    1,8-Diacetoxy-3-carboxyanthraquinone    :    13739-02-1    分子式：     C19H12O8    368.29    20mg
大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷    英文名稱：    Emodin-8-O-β-D-glucopyranoside    :    23313-21-5    分子式：     C21H20O10    432.41    20mg
 土大黃苷    英文名稱：     Rhaponticin    :    155-58-8    分子式：    C21H24O9    420.41    20mg