elisa定量檢測試劑盒結果判斷與分析

elisa定量檢測試劑盒結果判斷與分析：
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的ICAM-1/CD54標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的ICAM-1/CD54含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-80ng/ml
4、敏感度：0.1ng/ml
操作步驟：
1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
建議使用的實驗方案：
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
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