大鼠elisa定量檢測試劑盒實驗中的封閉液小知識

大鼠elisa定量檢測試劑盒實驗中的封閉液小知識
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：
1、ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白，起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加，當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可)，0.4%的明膠，但是實驗表明前者比較好，后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯(lián)板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上，結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了，不會影響實驗的準確度。
操作應當留意的安全事項：
1．防止直接觸摸停止液和底物A、B。一旦觸摸到這些液體，請趕快用水沖洗。
2、試驗中不要吃喝、抽煙或運用化妝品。
3．不要用嘴汲取試劑盒里的任何成份。
4．試劑應按標簽闡明書貯存，運用前康復到室溫。稀稀過后的規(guī)范品應丟掉，不行保存。
5．試驗中不必的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，防止蛻變。
6．不必的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前運用。
7．運用一次性的吸頭防止穿插污染，汲取停止液和底物A、B液時，防止運用帶金屬部分的加樣器。
8．運用潔凈的塑料容器配置洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9．洗刷酶標板時應充沛拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
10．底物A應蒸發(fā)，防止長時刻翻開蓋子。底物B對光靈敏，防止長時刻露出于光下。防止用手觸摸，有毒。試驗完成后應立即讀取OD值。
11．加入試劑的次序應共同，以確保一切反響板孔溫育的時刻一樣。
12．依照闡明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。
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