雜交瘤細(xì)胞；3G4培養(yǎng) 返回列表頁

雜交瘤細(xì)胞；3G4培養(yǎng)凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今為止，公司收錄背景資料清晰，細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株，其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子，少部分來自全國各地細(xì)胞研究所，細(xì)胞來源可靠，背景資料清晰，代數(shù)年輕，活力好。凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

細(xì)胞名稱  雜交瘤細(xì)胞；3G4培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  　半貼壁生長
特征特性    該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件  　RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　
支原體檢測  陰性　
STR   
同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定 
雜交瘤細(xì)胞；3G4培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
雜交瘤細(xì)胞；3G4培養(yǎng)操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
大黑附子Homalomena gigantea Oplodiol (1S,4R,4aR,8aR)-1,2,3,4,4a,5,8,8a-八氫-1,4a-二甲基-7-(1-甲基乙基)-1,4-二羥基 13902-62-0 C15H26O2 ≥95%

維生速B12VitcminB1220mg/支

胡蘆巴 Trigonellafoenum-graecumL. Trigonelline 葫蘆巴減 535-83-1 C7H7NO2 標(biāo)準(zhǔn)黏度液1 0078

含量測定丹醌100398-200701常溫，避光100mg

二類殘留溶劑-錄本標(biāo)準(zhǔn)品1.2ml×3ampules
曲梗崖摩Amoora slato-squamosa Nemoralisin none 942480-13-9 C20H28O4 ≥97%

竹紅菌速HypocrellinA7709-83-220mg

小葉藤黃Garcinia cowa 2,3',4,6-Tetraxy7noxybenzopxenone 2,3',4,6-四輕基二本甲同 26271-33-0 C13H10O5 *(100077

鑒別枸椽酸錄已定100306-200201常溫，避光50mg

nitnofurantoin 呋喃妥英標(biāo)準(zhǔn)品67-20-9 500mg
異補骨脂素 Paeoniflorin 523-50-2 20mg

木犀草苷Luteolin16879820mg

CiMiside B 升苷B 152685-91-1

Ecamsule Triethanolamine依莰舒三乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品92841-53-7200mg依莰舒三乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品

20(s)-人參皂苷F1;Ginseno 53963-43-2 20mg 訂購|咨詢
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