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人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812品牌凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
產品名稱 | 生長特性 | 貨期 |
懸浮生長 | 3-5天 |
細胞名稱 人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812品牌
形態特性 骨髓母細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 從一位慢性髓性白血病患者暴發期的外周血建立了KU812細胞株。 這些細胞至少有一個Ph1(費城)染色體。 這株細胞有一些嗜堿性細胞的標記(如Fc 受體,堿性顆粒,生成組胺),而淋巴標記陰性。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812品牌復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812品牌操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0389NCI-H1688(人典型小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2
人無色素睫狀上皮細胞總RNAHNPCEpiC tRNA
大耳山羊肺細胞;LDG-1 大鼠主動脈血管平滑肌細胞,A10細胞 BNL1ME A.7R.1細胞,BALB/C小鼠肝上皮細胞
人胚腎二倍體細胞;HEK-2
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
DU 145, 人前列腺癌細胞 Human
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF
LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5 肝癌細胞,SMMC-7721細胞 ECA細胞,小鼠艾氏腹水瘤細胞
小鼠少突膠質前體細胞MOPC
RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2
TPP1 Others Human 人 TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M065小鼠腎上皮細胞*培養基100mL
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 小細胞肺癌細胞,NEI-H209細胞 ECV304(人臍靜脈內皮細胞株)
小鼠成肌細胞;C2C12
CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 人細胞裂解液 (陽性對照)
四環素檢定、厭氧亞鹽還原桿菌、嗜熱菌芽孢檢驗培養基
改良GAM瓊脂抑菌劑 1ml*5 加入HB8462改良GAM瓊脂中
匹克 匹克氏肉湯基礎A Pick’s Broth BaseA 100 用于溶血性鏈球菌的增菌培養 (GB標準)
SBG磺胺增菌液250g/瓶含*,用于沙門氏菌選擇性增菌incubationmediaSBG磺胺增菌液250g/瓶含*,用于沙門氏菌選擇性增菌
CIN-1瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于分離小腸結腸炎耶爾森氏菌
AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic Brothe 抗生素肉湯 1.05273.0500 MERCK默克
改良的McBride瓊脂MMA 250g 用于單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離培養(GB/T4789.30-2003,SN0184-93)。
曲霉素瓊脂基礎(AFPA)AFPA用于曲霉菌分離培養
BifidobacteriumBSMedium
人外周血嗜堿性白血病細胞;KU812品牌梭菌強化培養基250g用于梭菌的增菌培養和計數
氯化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Rappaport-Vassiliadis Mdeium 用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(GB標準)
麥芽浸粉 Malt extract 250克 BR
改良CCDA培養基250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每培養基中添加07cubationmedia改良CCDA培養基250g/瓶用于彎曲菌選擇性分離,每培養基中添加0711
緩沖MUG瓊脂 100g 用于濾膜MUG法檢測食品中大腸桿菌數(SN/T1059.2)
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