人結直腸腺癌細胞；LS 174T LS174T培養 返回列表頁

人結直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]培養凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今為止，公司收錄背景資料清晰，細胞活力狀態良好的細胞株1420株，其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子，少部分來自全國各地細胞研究所，細胞來源可靠，背景資料清晰，代數年輕，活力好。凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

細胞名稱  人結直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]培養
形態特性   上皮細胞
生長特性  　貼壁生長
特征特性    LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)結腸腺癌細胞株的*化變種。 它比親本更易傳代，象LS 180一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細胞質粘液素液泡。 直腸抗原3陽性。 p53抗原表達陰性，但mRNA表達陽性。 與ATCC CL-187來源于同一個腫瘤。LS 174T細胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達未做檢測。
培養條件  　DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清，10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN5
凍存條件  *培養基+8%DMSO　
支原體檢測  陰性　
STR   Amelogenin:X；CSF1PO:10,13；D13S317:10；D16S539:11,13；D18S51:11,13,14；D19S433:14,15；D21S11:29,31；D2S1338:18,22；D3S1358:15,16,17；D5S818:11,16；D7S820:10.3,11；D8S1179:12,16；FGA:21,22；TH01:6,7；TPOX:8,9；vWA:15,17
同工酶

染色體

使用權限 A類 
人結直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]培養復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人結直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]培養操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0244WISH(人羊膜細胞)5×106cells/瓶×2

人骨骼肌細胞cDNAHSkMC cDNA

4T1細胞，人癌細胞 昆蟲細胞系,Sf-21細胞 肺微血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

NHDF adult Pellet 正常人皮膚成纖維細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells CCCSCK
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它

狗腎細胞;Super Tube

小鼠條紋神經細胞(MN-s)(1×106)

小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養基 100mL

人腦血管平滑肌細胞RNAHBCSMC miRNA5 μg

TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺微血管內皮細胞裂解物HPMECL

XPNPEP2 Others Human 人 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

BRL 大鼠肝細胞

CL-0126JAR(人胎盤絨毛膜癌細胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜上皮細胞

人正常前列腺基質永生化細胞;WPMY-1 人心肌成纖維細胞*培養基 100mL
TrypticSoyAgar

photobacteriumMedium

MIO培養基 MIO Medium 250 用于動力、吲哚和*試驗(FDA方法)

含*的胰酪胨大豆瓊脂250g/瓶用于細菌檢測和菌落總數的測定incubationmedia含*的胰酪胨大豆瓊脂250g/瓶用于細菌檢測和菌落總數的測定

LB瓊脂 250 用于基因工程菌大腸桿菌培養
SkimMilkSucroseCaseinDigestAgarMedium

50290 干酪素 BR 500g 即酪蛋白，培養基原材料 incubation media 50290 干酪素 BR 500g 即酪蛋白，培養基原材料

海氏腸球菌 生產L-* 支/瓶

SB培養基250用于基因工程菌大腸桿菌培養，營養非常豐富

*麥芽提取物瓊脂培養基 250g
人結直腸腺癌細胞；LS 174T [LS174T]培養血平板2407090mm×20個用于營養要求較高的細菌的培養及溶血試驗(GB4789./T4789.37-2008，GB4789.30-2...

Schaedler Anaerobic Broth /Schaedler 厭氧肉湯 Oxoid 500G incubation media Schaedler Anaerobic Broth /Schaedler 厭氧肉湯 Oxoid 500G

斯氏梭菌 支/瓶

乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂250g用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(SN/T2)

Salmonella-ShigellaAgar

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