Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng) 返回列表頁

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今為止，公司收錄背景資料清晰，細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株，其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子，少部分來自全國各地細(xì)胞研究所，細(xì)胞來源可靠，背景資料清晰，代數(shù)年輕，活力好。凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  　貼壁生長
特征特性    該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件  　McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法   1:2~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：22,22；D13S317：8,11；D16S539：12,12；D18S51：16,17,18；D19S433：14,14.2；D21S11：30,31,31.2；D2S1338：18,23；D3S1358：14,14；D5S818：11,11；D6S1043：12,12；D7S820：13,14；D8S1179：14,15；FGA：24,26；Penta E：5,13；TH01：9,9.3；TPOX：8,11；vWA：17,19；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類 
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0172NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人無色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL

M453細(xì)胞，人癌細(xì)胞 鼠肉瘤細(xì)胞,S-180-S2D9細(xì)胞 卵巢癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM M2 adult Pellet 正常人表皮黑素細(xì)胞團(tuán)塊(捐獻(xiàn)者)，培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HRGECL
rEPC，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Rattus

CM-H112人脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人成纖維細(xì)胞(HMF)(5×105)

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人骨肉瘤細(xì)胞;HOS

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EPHA6 / EHK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-(HEK-a) ( 5×105 )

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
鹽胱酸增菌液SC20支/包用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

假單胞分離肉湯 250g 用于假單胞菌群增菌培養(yǎng)

YM11瓊脂 YM11 Agar 250 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)

Eugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)incubationmediaEugon瓊脂250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)

ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基2406g滅菌后冷至45℃左右時(shí)加入5%脫纖維羊血，用于空腸彎曲菌的培養(yǎng)。(CP、GB、EP、USP)

4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

紫晶口磨 提高酒的含酯量，生香味 支/瓶

BETA-SSA瓊脂250g用于鏈球菌的選擇性分離培養(yǎng)

Cary-Blair氏*(不含瓊脂) 250g 用于運(yùn)送腸道致病菌。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)鹽胨水培養(yǎng)基250g用于鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn)

乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 250(g) incubation media 乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基 250(g)

V-P半固體瓊脂 Voges-Proskauer Semisolid Agar 250克 細(xì)菌V-P試驗(yàn)

察氏瓊脂250用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用incubationmedia察氏瓊脂250用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用

GN增菌液(10ml) 10ml*20 主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3-Cas9-562培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。