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    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌

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    所  在  地上海市

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    更新時間:2017-09-07 11:52:54瀏覽次數:158次

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    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌現貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現貨,質量保證,公司所有產品僅供科研使用,不得用于醫學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

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    產品名稱

    生長特性

    貨期

    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌

    貼壁生長

    35

    細胞名稱  Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌
    形態特性   上皮樣
    生長特性   貼壁生長
    特征特性    該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
    培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine400ug/ml G418
    傳代方法   1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
    傳代情況  C3
    凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 
    支原體檢測  培養法(- 
    STR   Amelogeninx,x;CSF1PO11,12D12S39118,21D13S31711,14D16S5399,9;D18S5112,17D19S43313,14.2;D21S1129,30;D2S133816,24;D3S135815,17;D5S81812,12;D6S104311,14D7S8209,9;D8S117911,14;FGA23,23;Penta E10,12;TH018,8TPOX8,10;vWA16,17;
    同工酶

    染色體

    使用權限 A
    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
    冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3–80以下,再放入液氮槽期儲存。-20不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
    迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCCNIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4300分鐘→(-2030分鐘*)→-8016~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌復蘇操作要點:
    1)將培養基在37水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
    2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
    3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
    4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
    5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
    6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌操作步驟:
    1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
    2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37溫箱培養。
    IL27 Others Human IL27 / Interleukin-27 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

    CL-0146LTEP-a-2(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

    人尿道上皮細胞裂解物HUCL

    長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞 Ranca細胞,小鼠腎癌細胞

    SV40T轉化的人胚腎細胞;293T

    HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
    mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse

    CM-R080大鼠大隱靜脈內皮細胞*培養基100mL

    人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )

    C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞*培養基 100mL

    人癌細胞;MDA-MB-468

    FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細胞裂解液 (陽性對照)
    人羊膜細胞;WISH

    人肺動脈成纖維細胞 (HPAF)( 5×105 )

    CL-0317AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2

    人胃癌細胞;MGC-803 大鼠胎兒表皮角質形成層細胞*培養基 100mL

    Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞

    RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照)
    Iodinesolution

    固氮根瘤菌培養基 250g 用于固氮菌的分離培養

    腸道菌計數瓊脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 250 用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)

    胰酪胨大豆瓊脂培養基250g/瓶用于細菌培養及抑菌劑效力檢查incubationmedia胰酪胨大豆瓊脂培養基250g/瓶用于細菌培養及抑菌劑效力檢查

    MFC瓊脂平板(9cm) 10/ 用于大腸菌群的濾膜法檢測
    鹽蛋白胨水培養基27060250g用于鑒別綠膿桿菌分解鹽產氣試驗

    3501-prf SkMCM-prf 骨骼肌細胞培養基 500 ml incubation media 3501-prf SkMCM-prf 骨骼肌細胞培養基 500 ml

    RoseBengalAgarMedium

    BileAesculinAzideAgar

    NTM培養基 250g 用于淋球菌的分離培養(Quelab方法)
    Cas9穩定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌氧化酶試紙片于空腸彎曲菌氧化酶試驗

    水平板計數瓊脂培養基 Water Plate Count Agar 用于飼料中細菌總數測定

    抗生素檢定培養基1(PH) Antibiotic Agar 250 用于磺芐*效價測定

    DYS耶爾森菌瓊脂250g/瓶用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的分離培養incubationmediaDYS耶爾森菌瓊脂250g/瓶用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的分離培養

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