Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養 返回列表頁

Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今為止，公司收錄背景資料清晰，細胞活力狀態良好的細胞株1420株，其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子，少部分來自全國各地細胞研究所，細胞來源可靠，背景資料清晰，代數年輕，活力好。凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

細胞名稱  Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養
形態特性   上皮樣
生長特性  　貼壁生長
特征特性    該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養條件  　MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法   消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內可長滿。
傳代情況  C3
凍存條件  *培養基+8%DMSO　
支原體檢測  陰性　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；
同工酶

染色體

使用權限 A類 
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
TNFSF8 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0124IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL

COC1/CDDP細胞，人卵巢癌*耐藥株 大黃魚腎細胞,PCK細胞 臍靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2

HTSMC Pellet 人類氣管平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人臍靜脈平滑肌細胞裂解物HUVSMCL
小鼠神經干細胞 Mouse

CM-M043小鼠小腸平滑肌細胞*培養基100mL

人晶狀體上皮細胞 (HLEpiC)( 5×105 )

小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino 小鼠頜下腺上皮細胞*培養基 100mL

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1

人骨骼肌成肌細胞(HSkMM)(5×105)

CL-0227T-24(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2

人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) 大鼠神經元細胞*培養基 100mL

N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細胞

LYPD3 Others Human 人 LYPD3 / MIG-C4 人細胞裂解液 (陽性對照)
四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養，需加入煌綠和液

BYP瓊脂培養基 250g 用于巴氏桿菌分離培養

動力-吲哚-尿素培養基基礎(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250 用于細菌的復合生化試驗

哥倫比亞血瓊脂基礎250g/瓶廣泛用于細菌，尤其是彎曲桿菌、鏈球菌等苛養菌的培養，每培養基中添加5ml~5070ubationmedia哥倫比亞血瓊脂基礎250g/瓶廣泛用于細菌，尤其是彎曲桿菌、鏈球菌等苛養菌的培養，每培養基中添加5ml~50701

BismuthSulfiteAgar
亞利桑那菌瓊脂(SA)2300g用于亞利桑那菌選擇性分離培養。(SN02)

2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid incubation media 2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid

普雷恩毛霉 強化酵淀粉糖化液，酒精及白酒酵母 支/瓶

NutrientBroth

連四鹽培養基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養。
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-586培養液體硫乙醇酸鹽培養基250g用于藥品，生物制品無菌試驗，培養菌、厭氣菌(GB標準)

馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基(PDA) 250(g) incubation media 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基(PDA) 250(g)

腸道菌增菌液 Enterobacteria Enrichment Broth 250克 腸道菌的增菌培養

氯多粘菌素B肉湯基礎(SCPB)250用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養，用前應無菌加入多粘菌素B(SN標準)incubationmedia氯多粘菌素B肉湯基礎(SCPB)250用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養，用前應無菌加入多粘菌素B(SN標準)

緩沖蛋白胨水(BPW) 250g 用于沙門氏菌前增菌培養，亦可用于李氏菌前增菌培養(GB、SN標準)

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