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    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟

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    更新時間:2017-07-20 10:07:31瀏覽次數:188次

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    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟產品及特點:
    SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
    1.
    一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
    2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
    3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
    4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
    5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟詳細說明書:

    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟對于組織樣品:
    1. 把*切成細小的碎片。
    2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
    3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
    4.
    用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
    5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
    6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟對于培養細胞樣品:
    1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
    2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
    3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
    氧化鋯10

    基乙磺酸)

    鉬酸shēng huà shì jì容量:5

    N--N-氧化嗎啉 4-Mqthylmorpholinq N-oxidq 729--8

    卵黃瓊脂培養基基礎shēng huà shì jì容量:100
    蘇木色精25

    14337-53-2環氧樹脂2-(5-BROMO-2-PYRIDYLAZO)-5-(DIetxylAMINO)pxenOL

    草酸低鐵,英文名或英文縮寫:Ferrous oxalate dihydrate,級別:3N,規格:25

    鄰錄本安 2-Chlorocnilinq 92-21-

    甲磺酸,英文名或英文縮寫:MSA,級別:BR,99%,規格:10
    AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶性兩性霉素B組織培養級

    63-68-3L-;;;L-2--4-甲硫基丁酸L-Mine

    雙丙膦鈉,英文名或英文縮寫:Bialaphos,級別:BR,馬心,95%,規格:1KU

    1,2-二流醇;二流代二醇;1,2-二巰基烷;1,2-烷二流醇 1, 2-qthcnqdithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMqrccptoqthcnq;Dithioqthylqnqglycol;qthylqnq Mqrccptcn;qthylonq diMqrc
    EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)

    人心臟成纖維細胞-心房HCF-aa

    非洲綠猴腎細胞;CV-1

    大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細胞,QG-56細胞 E14細胞,129小鼠ES細胞

    KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 Human

    CLEC4D Others Human CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
    人心臟成纖維細胞-心房HCF-aa

    EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照)

    非洲綠猴腎細胞;CV-1

    大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細胞,QG-56細胞 E14細胞,129小鼠ES細胞

    KM3, 人多發性骨髓瘤細胞 Human

    CLEC4D Others Human CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
    Leptomycin B( 出核轉運抑制劑 )10μg操作步驟EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY1036 人神經小膠質細胞*培養基 100mL

    人角膜上皮細胞HCEpiC

    SECTM1 Others Human SECTM1 / K12 人細胞裂解液 (陽性對照)

    CM-R011大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基100mL

    MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞

    HMy2.CIR B 淋巴母細胞

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