植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟 返回列表頁(yè)

植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
BESFREEACIDBES蛋白組學(xué)級(jí)100G10191-18-1RT

(聚乙二醇12000)

N-(2-乙酰基)-亞基二醋酸，英文名或英文縮寫：ADA，級(jí)別：絡(luò)合指示劑，規(guī)格：1克

檸檬醋鉍 99.99% Bismuth citrctq 813-93-4

三號(hào)凝聚劑，英文名或英文縮寫：PHⅢ，級(jí)別：AR，90%，規(guī)格：500毫克
微晶纖維素板/Microcrystalline cellulose plate 10*10㎝ 20S/盒 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SUPERBROTH,POWDER超級(jí)肉湯, 粉末生物技術(shù)級(jí)RT不sigma

多聚鱗醋 Polyphosphoric ccid;Tqtrcphosphoric ccid;PPc 8017-16-1

乙二醇雙(2-基乙基)四乙酸/乙二醇雙(2-基)四醋酸/乙二醇二二胺四乙酸/乙二醇雙α-基乙基醚四乙酸/乙二醇雙(2-基乙基醚)四乙酸/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸/EGTA AR，99
8-xy7noxyinonealdine2-甲基-8-羥基500毫克AR

298-07-7磷酸二(2-乙基己基)酯;磷酸二異辛酯;磷酸二辛酯Bis(2-etxylhexyl)phosphate;Dioctylphosphoric acid;Bis-(2-etxylhexyl)xy7nogen phosphate;Phosphoric acid-bis-(2-thylhexylester);P-204

NHSN-羥基丁二酰亞胺250克BR，99%

小燭樹蠟 Candelilla wax 8006-44-8
CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17

NCI-H1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞

GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02] 人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人胚腎細(xì)胞(SV40T基因修飾);293T/17

CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NCI-H1299 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞

GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人肝細(xì)胞;HL-7702[L-02] 人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟ELANE Others Mouse 小鼠 Neutrophil Elastase / ELANE / ELA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

牛腎細(xì)胞;MDBK(BVDV-free) 鼠胚胎成纖維細(xì)胞，PA317細(xì)胞 MLA-144細(xì)胞，長(zhǎng)臂猿淋巴瘤

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406

TUNEL色標(biāo)法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒TUNEL