磷酸酶抑制劑混合物片劑20片實驗方法 返回列表頁

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磷酸酶抑制劑混合物片劑20片實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
磷酸酶抑制劑混合物片劑20片實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
HBEGF Protein Human 重組人 HBEGF / DTR 蛋白

大鼠淋巴成纖維細胞*培養基 100mL

EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照)

MC38小鼠結腸癌細胞 MC38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS

小鼠垂體細胞MPC

TE-13(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
小鼠間充質干細胞-骨髓MMSC-bm

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

HAN 人羊膜細胞

CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養基100mL

Raji，人Burkitt's淋巴瘤細胞

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0919 人成骨細胞*培養基 100mL
NT5E Others Rat 大鼠 CD73 / NT5E 人細胞裂解液 (陽性對照)

人羊膜間充質基質細胞

人胚肺二倍體細胞;KMB-17

A498細胞，人腎癌細胞系 蝙蝠肺細胞,Tb 1 Lu細胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)5×106cells/瓶×2

EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2

hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類CD14+單核細胞，單一來源，預選型 10 million 人結膜成纖維細胞HConF
大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 ，英文名： Lp-α ELISA Kit

人腎上腺皮質抗體(ACA)ELISA檢測試劑盒Humanadrenalcortexantibody,ACAELISAKit 96T/48T

大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)免疫試劑盒 Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit

CLIAKitforTie1(Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1)ELISAkit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域*激酶1規格：48T/96T

全組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒10次

ELISAKitAPSA人抗磷脂酰*抗體規格：48T/96T
人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 人壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

HumanMethylaseELISAKit 人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISA試劑盒人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明膠法比色定量檢測試劑盒20次

HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規格：96T/48T
磷酸酶抑制劑混合物片劑20片實驗方法大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*巰基轉移酶（GST）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*過氧化酶（GSH-Px）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝