*蛋白激酶抑制劑100mg實驗方法 返回列表頁

*蛋白激酶抑制劑100mg實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
*蛋白激酶抑制劑100mg實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
*蛋白激酶抑制劑100mg實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

大鼠胰腺星狀細胞*培養基 100mL

BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細胞裂解液 (陽性對照)

MA104非洲綠猴胚胎腎上皮細胞 MA104 Africa green monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS

成骨細胞培養基ObM

NCI-H661(人大細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腎上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CoC2(懸浮) 卵巢癌

COLO 205人結腸癌細胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白

人角膜成纖維細胞 (HcorF)( 5×105 ) EPC, 大鼠血管內皮祖細胞 Rattus
小鼠小神經膠質細胞(MM)(5×105)

人雪旺細胞總RNAHSC tRNA

黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR

C57BL/6小鼠T細胞淋巴瘤細胞;RMA 小鼠角膜上皮細胞*培養基 100mL

HBE, 正常人支氣管上皮細胞系 Human

NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腎上腺髓質素前體(Pro-ADM)免疫試劑盒 Human Proadrenomedullin,Pro-ADM ELISA Kit

MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規格：96T/48T

tComplementfragment4a,C4aELISA試劑盒大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanmatrixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA試劑盒人基質金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat neutrophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒

HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒*A(IgA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Humanleukoregulin，LRELISAKit人白細胞調節素(LR)ELISA試劑盒規格：96T/48T
*蛋白激酶抑制劑100mg實驗方法大鼠黃體生成素（LH）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠氧化酶（XOD）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠環氧合酶2（COX-2）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠*(cAMP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝