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    酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法

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    更新時間:2017-07-10 11:55:09瀏覽次數:195次

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    酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法公司供應的細胞生物學試劑品種齊全,質量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

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    酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法實驗操作步驟:
    1、液的配制:
    六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
    2、陽性對照的設置:
        把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
    3、對于懸浮細胞:
    1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
    2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
    3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
    437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
    5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
    6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
    酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法注意事項
    1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
    2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
    3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
    4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
    5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
    6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
    7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
    BTC Protein Human 重組人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標簽)

    大鼠肺動脈成纖維細胞*培養基 100mL

    CANT1 Others Human CANT1 人細胞裂解液 (陽性對照)

    ROS1728 大鼠成骨細胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS

    上皮細胞培養基MEpiCM

    MV3(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
    T-104BII型膠原酶(100mL酶解緩沖液)10mL

    CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照)

    星形細胞生長添加物AGS

    TE 354.T細胞,人皮膚基底細胞癌 人胚腎細胞,AAV-293細胞 原代單核細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml

    盤羊皮膚細胞;ASHS3

    S100A1 Others Human S100A1 人細胞裂解液 (陽性對照)
    HBEGF Others Human HBEGF / DTR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

    人星形膠質細胞裂解物HAL

    人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]

    HCC 94[HCC941122]細胞,子宮鱗癌細胞(高分化) 人低分化胃癌細胞,SGC7901細胞 豬腎細胞;PK(15)

    tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B);Pan02-CAG-tTA-2D1

    DKK3 Others Mouse 小鼠 Dkk-3 / DKK3 人細胞裂解液 (陽性對照)
    大鼠游離*狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit

    人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T

    大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1R)免疫試劑盒 Rat soluble interleukin-1 receptor ,sIL-1R ELISA kit

    CLIAKitforTdT(Humanterminaldeoxynucleotidyltransferase)ELISAKit人末端脫氧核苷酸轉移酶規格:48T/96T

    人體HemoglobinERFLP基因分析試劑盒20

    ELISAKitanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規格:48T/96T
    人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    Human neutrophilic alkaline phosphatase (NAP) ELISA Kit 人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒

    Humanpigmentepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

    HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISA試劑盒人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

    組織基質金屬蛋白酶3H同位素標記檢測試劑盒(不包括同位素)20

    HumanleukotrieneE4LT-E4ELISAKit人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
    酵母膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T實驗方法大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    大鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    大鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

     

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