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高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)
大鼠肺成纖維細胞*培養基 100mL
CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CTLA4 Ig-24細胞,中國倉鼠卵巢細胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細胞) CM-H002人肺大動脈內皮細胞*培養基100mL
間充質干細胞脂肪細胞分化培養基MADM-prf
MDA-MB-435(人癌高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M033小鼠肝實質細胞*培養基100mL
WM451, 人黑色素瘤細胞 導管瘤細胞,BT474細胞 VERO(非洲綠猴腎細胞)
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6
LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人細胞裂解液 (陽性對照)
C7 Others Human 人 C7 / Complement component 7 人細胞裂解液 (陽性對照)
人心臟成纖維細胞裂解物HCFL
人腦靜脈血管平滑肌細胞*培養基 100mL
MES-13細胞,小鼠腎小球系膜細胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細胞;GP-F1
EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)
BE(2)-M17(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
大鼠去甲(NE)ELISA試劑盒 ,英文名: NE ELISA Kit
人生長調節致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA檢測試劑盒Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISAKit 96T/48T
魚ELISA試劑盒
CLIAKitforPhaseolusvulgarisagglutinin,PHAELISAKit菜豆凝集素規格:48T/96T
食物氨含量光譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCCK人膽囊收縮素/腸促*肽規格:48T/96T
人脂肪型脂肪酸結合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fatty acid binding protein (FABP) ELISA Kit 人脂肪酸結合蛋白(FABP)ELISA試劑盒
Humannitricoxide,NOELISAKit 人血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISA試劑盒人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次
Humanlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISAKit人脂多糖結合蛋白(LBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
高爾基體蛋白提取試劑盒50T售后服務大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠降鈣素受體(CTR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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