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溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
溶酶體蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽)

大鼠氣管上皮細胞*培養基 100mL

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細胞裂解液 (陽性對照)

CRFK細胞，貓腎細胞 SK-HEP-1(人肝癌細胞) 獼猴肺細胞;MML2

角質細胞生長添加物KGS

M14(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 顱蓋造骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
心肌細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)

CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]

MDA-MB-231細胞，癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7402細胞 CL-00086T-CEM (人T細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

倉鼠源細胞

CDH8 Others Human 人 Cadherin-8 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照)

人心臟成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L

小鼠單核巨噬細胞;J774A.1

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL

AGS人胃腺癌細胞 Human

TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人生長分化因子2(GDF2)免疫試劑盒 human growth differentiation factor 2,GDF2 ELISA Kit

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Sheepmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA試劑盒綿羊主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanMatrixGlaProtein,MGPELISA試劑盒人基質γ羧基*蛋白(MGP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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組織肌酸激酶(CK)總活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次

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