乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法 返回列表頁(yè)

乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
乳清蛋白提取試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
表皮生長(zhǎng)因子

大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

A9細(xì)胞，小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 HCC1428(人癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

星形細(xì)胞生長(zhǎng)添加物SteCGS

Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CSNK2A1 Others Human 人 CSNK2A1 / CK2A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7

CHO/dhFr-細(xì)胞，中國(guó)倉(cāng)鼠二氫*還原酶缺陷細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HuH-7細(xì)胞 CL-0144LoVo(人大腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人心臟成纖維細(xì)胞cDNAHCF cDNA

4179 長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞

CL-0271D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞

人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1 人支持細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人生長(zhǎng)激素(GH)免疫試劑盒 Human growth hormone,HGH ELISA KIT

MouseGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

SheepInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanmastcelltryptase,MCISA試劑盒人肥大細(xì)胞類*(MCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

humanphosphofructokinase-plaet,PFKPELISAKit人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanHyaluronidase,HAaseELISA試劑盒人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織肌酐(CREATININE)酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanlipoteichoicacids,LTAELISAKit人脂磷壁酸(LTA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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