線粒體蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法 返回列表頁

線粒體蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
線粒體蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
線粒體蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標簽)

人角膜上皮細胞*培養基 100mL

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照)

HPT-8細胞，小鼠飼養層上皮細胞 293(轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184

人腦微血管內皮細胞裂解物HBMECL

EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2 大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
肝竇內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠骨骼肌細胞*培養基 100mL

208F大鼠成纖維細胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纖維細胞

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標簽)

IAR20(大鼠肝細胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小細胞肺癌細胞;NCI-H446

人胃粘膜上皮細胞*培養基 100mL

MFC細胞，小鼠胃癌細胞 BHK(幼倉鼠腎細胞) 獼猴肺細胞;MML2

XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標簽)

RBE(人膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA試劑盒 ，英文名： OAS1 ELISA Kit

人*(SS)ELISA檢測試劑盒HumanSomatostatin,SSELISAKit 96T/48T

大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒 Rat hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA Kit

CLIAKitforTSGF(HumanTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor)ELISAKit人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子規格：48T/96T

胚胎干細胞外胚層(ectoderm)細胞分化熒光檢測試劑盒10次

ELISAKitCoxV-IgM人柯薩奇病毒IgM規格：48T/96T
人壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human mucin / mucin 5B (MUC5B) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒

HumanCyclin-D2ELISAKit 人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Humanlowmolecular-weightprotein/proteasomebeta-typesubunit,LMP7/PSMB9ELISAKit人低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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大鼠醌氧化還原酶1（NQ01）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠可溶性壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝