GST標簽蛋白純化試劑盒10ml實驗方法 返回列表頁

GST標簽蛋白純化試劑盒10ml實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
GST標簽蛋白純化試劑盒10ml實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
GST標簽蛋白純化試劑盒10ml實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 標簽)

人破骨細胞*培養基 100mL

ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照)

PA317細胞，小鼠胚成纖維包裝細胞 6T-CEM(T細胞白血病) 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1

人肺動脈平滑肌細胞cDNAHPASMC cDNA

A-427(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9
CL-0383MDA-MB-436(人癌細胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人細胞裂解液 (陽性對照)

人角膜上皮細胞總RNAHCEpiC tRNA

ZR75-1細胞，人癌細胞 129小鼠ES細胞,D3細胞 WM35, 人黑色素瘤細胞

MV3(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人臍動脈內皮細胞團塊 > 1 mio.cells 神經細胞培養基NM-prf
CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照)

人小膠質細胞總RNAHM tRNA

人真皮淋巴上皮細胞*培養基 100mL

COS-7細胞，SV40轉化的非洲綠猴腎細胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽)

Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1
大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒 Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit

MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit小鼠FMS樣*激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Ratβ2-glycoprotein1antibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA試劑盒大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/HLA-ⅢELISA試劑盒人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒規格：96T/48T
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Human free testosterone (F-TESTO) ELISA Kit 人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒

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組織*還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

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