考馬斯亮藍快速染色液100ml實驗方法 返回列表頁

考馬斯亮藍快速染色液100ml實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
考馬斯亮藍快速染色液100ml實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標(biāo)簽)

人輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

B16BL6細胞，小鼠黑色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM932

人男性正常細胞;Hs68

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6

COLO 205細胞，結(jié)腸癌細胞 正常人肝細胞,L-02細胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞)5×106cells/瓶×2

人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WD10

CLEC4M Others Human 人 CD299 人細胞裂解液 (陽性對照)
IL6ST Others Human 人 IL6ST / gp130 / CD130 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0]

CM-R074大鼠心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

GES-1細胞，人胃粘膜細胞 人神經(jīng)上皮瘤細胞,SH-SY5Y細胞 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5

CoC1(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

PVR Others Human 人 PVR / CD155 / NECL5 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠*(Cortisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人絲蟲病抗體(IgG4)免疫試劑盒 Human filariasis(philariasis)antibody IgG4 ELISA kit

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣

Raturokinase,UKELISA試劑盒大鼠*(UK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISA試劑盒人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit人*(PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
山羊孤啡肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human glucagon like peptide 1 (GLP-1) ELISA Kit 人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒

HumanEndothelialnitricoxidesynthase3,eNOS-3ELISAKit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISA試劑盒人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISAKit人黑色素細胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
考馬斯亮藍快速染色液100ml實驗方法大鼠載脂蛋白A2(apo-A2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠載脂蛋白A(apo-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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