5×非變性蛋白上樣緩沖液10ml免費代測 返回列表頁

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5×非變性蛋白上樣緩沖液10ml免費代測實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
5×非變性蛋白上樣緩沖液10ml免費代測注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

人腎上皮細胞*培養基 100mL

IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照)

B16F10細胞，小鼠黑色素瘤高轉移細胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

SHG-44 (人膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-R111大鼠雪旺氏細胞*培養基100mL

ECD Others Human 人 ECD / Ecdysoneless homolog 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

豬角膜上皮細胞PCEpiC

非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 人單核細胞，THP-1細胞 Caco-2(結腸腺癌細胞)

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0919

EFNB2 Others Mouse 小鼠 EFNB2 / EphrinB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 )

人腎透明細胞癌;Caki-1

RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞

人十二脂腸腺癌;HuTu-80 大鼠前列腺上皮細胞*培養基 100mL

NFS-60 小鼠白血病細胞G-CSF依賴性

ECE1 Others Human 人 ECE1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)免疫試劑盒 Human mitogen-activated protein kinase kinase 6,MAP2K6 ELISA kit

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣

Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISA試劑盒大鼠*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

humanlungcancerMarkerELISA試劑盒人肺癌標志物ELISA試劑盒規格：96T/48T

HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
山羊骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 組裝/原裝

Rat free three iodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒

HumanCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humangrowth-regulatedoncogeneβ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROβ/MGSAELISA試劑盒人生長調節致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織二胺氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒20次

HumanMelanomaMarkerA,MART/Melan-AELISAKit人黑色素瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒規格：96T/48T
5×非變性蛋白上樣緩沖液10ml免費代測大鼠再生基因蛋白IV（REG-4）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝