ELISA包被緩沖液（1×）100ml售后服務(wù) 返回列表頁

ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
ELISA包被緩沖液(1×)100ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

NXPH1 Others Mouse 小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CCC-HSF-1細(xì)胞，人皮膚成纖維細(xì)胞 粘質(zhì)沙雷伯氏菌 中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA

NCI-N87(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 VSIG8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株

EGFR Others Human 人 EGFR / HER1 / ErbB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES

FaDu細(xì)胞，人咽鱗癌細(xì)胞 人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD4細(xì)胞 CL-0379MCF 7B(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA

IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
PCNA Others Human 人 PCNA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

HEL299細(xì)胞，紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞 巨核細(xì)胞,Dami細(xì)胞 人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422

CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人胎兒血紅蛋白(HBF)免疫試劑盒 Human fetal hemoglobin,HBF ELISA Kit

雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣

RatTotalbileacide,TBAELISA試劑盒大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanLinkerforactivationofTcell,LAISA試劑盒人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human folic acid (FA) ELISA Kit 人*(FA)ELISA試劑盒

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanGlucosetransporter3,GLUT3ELISA試劑盒人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(GLUT3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20/50次

Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine，MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
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