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植物內質網膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
植物內質網膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物內質網膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
ANGPTL7 Protein Canine 重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標簽)
人肺大動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照)
A875細胞,人黑色素瘤細胞 阪崎腸桿菌 人紅系白血病細胞;TF-1
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A
KB(人口腔表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
人滑膜細胞HS
EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠肝動脈內皮細胞*培養基 100mL
HMy2.CIR人B淋巴母細胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養基(GIBCO)+20%FBS
FGF9 Protein Canine 重組狗 FGF9 / FGF-9 蛋白 (Fc 標簽)
A3(人T淋巴細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 子宮癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;M619
人絨毛膜間充質基質細胞
BT474細胞,導管瘤細胞 人絨毛膜癌,JEG細胞 人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μg
EB病毒轉化的絨猴淋巴細胞;B95-8
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠神經營養因子3(NT-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒 Human Carbonhydrate Antigen 125,CA125 ELISA Kit
土壤無機磷(S-PHOS)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatThrombopoietin,TPOELISA試劑盒大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanLeptinReceptor,LEPRELISA試劑盒人瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humannitricoxide,NOELISAKit人一氧化氮(NO)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) ELISA Kit 大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
HumanAdenovirusIgG,ADV-IgGELISAKit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanfreefattyacids,FFAELISA試劑盒人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織半*蛋白酶-13(PASE-13)活性熒光定量檢測試劑盒20次
HumanNeuroglobin,NGBELISAKit人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物內質網膜蛋白提取試劑盒100T使用說明書犬瘟熱病毒(CDV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素E(VE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬維生素A(VA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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