植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法 返回列表頁

植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm，發射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2

C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells

RCN3 Others Human 人 RCN3 人細胞裂解液 (陽性對照)

FBM細胞，胎兒骨髓間充質細胞 嬰兒雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406

人胚肺二倍體細胞;HL

HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC

EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK (aa 563-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 [CIP 104786]細胞 293 [HEK-293] (人胚腎細胞)

人T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E

CD5 Others Mouse 小鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解液 (陽性對照)
EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Development 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺平滑肌細胞cDNAHPSMC cDNA

雜交瘤(B類);C3110D2B2

BT549細胞，管癌細胞 人喉癌細胞,M4e細胞 大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

NCR3 Others Human 人 NKp30 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠Klotho蛋白(KL)ELISA試劑盒 ，英文名： KL ELISA Kit

人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測試劑盒Humanglycogensynthasekinase,GSKELISAKit 96T/48T

大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit

CLIAKitforVZV-IgM(HumanVaricellazostervirusIgMELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgM規格：48T/96T

羅丹明123(RHODANMINE123)溶液(50微摩爾)0.5毫升

ELISAKitIgA*A規格：48T/96T
兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat plaet derived growth factor AB (PDGF-AB) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒

HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit 人蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanfibronectionrelatedantigen,FRAELISA試劑盒人纖維連接素相關抗原(FRA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

組織氨含量熒光定量檢測試劑盒20次

Humanneutrophilicalkalinephosphatase,NAPELISAKit人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）50T實驗方法人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝