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1X PBS緩沖液粉劑1L*10實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
1X PBS緩沖液粉劑1L*10實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過長有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS

CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CRT細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 黑曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-h miRNA5 μg

人肺支氣管癌細(xì)胞;NCI-H1650

HBL-100(人整合SV40基因的上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2
小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

ERP27 Others Human 人 ERP27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HL-60人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS

IGFBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc
IL1RL1 Others Mouse 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL

MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 Human

CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人鐵蛋白重鏈(FTH)免疫試劑盒 Human Ferritin, Heavy Polypeptide,FTH ELISA Kit

酸性木聚糖酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sTRAILELISA試劑盒大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanKallikrein6,KLK6ELISA試劑盒人*6(KLK6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanNetrin-4,Ntn4ELISAKit人軸突生長誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒

Humananti-cellmembraneDNAantibody,cmDNAELISAKit 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanestrogen,EELISA試劑盒人雌激素(E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織SRCN2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Humanornithinecarbamoyltransferase,OCISAKit人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1X PBS緩沖液粉劑1L*10實(shí)驗(yàn)方法人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人α1抗胰*(AACT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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